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更新时间:2024-10-29
大鼠骨外膜细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
骨组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7632 |
细胞简介:
大鼠骨外膜分离自骨外膜组织;骨外膜是指成骨细胞与破骨细胞紧贴骨密质外面包着的那层膜;在骨外膜和骨内膜中含有一种能够生成骨的细胞,称为成骨细胞,这种细胞具有使骨骼生长的功能。在骨外膜中还有另外一种专门破坏骨细胞的细胞,称为破骨细胞。这两种细胞作用相反又相互依据。成骨细胞像建筑工人,不停地生成新的骨组织,破骨细胞则像维修工人,不停地清除老化、死亡、破碎的骨结构,并且还负责拆除“违章建筑",就是除去不需要的多余的骨组织,从而使骨的整体结构更符合生物力学的需要。正常情况下,两种细胞之间处于动态的平衡之中,完成骨的生长发育的新陈代谢。骨折之后,成骨细胞首先启动,从而促使新骨痂的生成,即骨折的愈合。但是,股痂只是恢复了骨的连续性,往往不符合生物力学的需要,改建塑形的过程则必须有破骨细胞的参与才能完成。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠骨外膜采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠骨外膜经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
质粒大量提取试剂盒(非柱式法) 5T
QSPlasmidMaxiKit 10T
血液(溶液型) 10ml(血量)
Relax-ISOBloodDNAKitI 50ml(血量)
猪α干扰素(IFN-α)ELISA 试剂盒
Human ai murine typhus aibody (ai-typhus-Ab) ELISA Kit 人抗斑疹伤寒抗体(ai-typhus-Ab)试剂盒
Porcineierleukin8,IL-8ELISAKit 猪白介素8(IL-8/CXCL8)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAgIa(HumanangiotensinIIreceptoypeIa)ELISAKit人血管紧张素Ⅱ受体Ⅰa型
血液牛病毒性腹泻病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定性试剂盒20次
MouseypsinELISAKit小鼠(ypsin)试剂盒
AF680标记的腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体
二酰基甘油酰基转移酶2样蛋白3抗体
VCAM1重组人 VCAM-1 / CD106 蛋白 (His 标签) Protein
雄激素受体(AR)重组蛋白 Recombinant Androgen Receptor (AR)
IL23重组人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 标签) Protein
AGT Protein Human 重组人 Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 蛋白 (His 标签)
Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 367-606, Fc 标签)
雄激素受体(AR)重组蛋白 Recombinant Androgen Receptor (AR)
AGT Protein Human 重组人 Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 蛋白 (His 标签)
VCAM1重组人 VCAM-1 / CD106 蛋白 (His 标签) Protein
Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 367-606, Fc 标签)
IL23重组人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 标签) Protein
大鼠骨外膜细胞小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA 试剂盒
Rat ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗体IgG(ACA-IgG)试剂盒
HumanovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit 人卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)试剂盒 进口分装
Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-Ab试剂盒人抗BP180抗体(BP180-Ab)试剂盒
植物核糖体分离试剂盒10次
Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)试剂盒
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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