欢迎访问上海研生实业有限公司网站

返回首页|联系我们

全国统一服务热线:

15201736385
产品中心您当前的位置:首页 > 产品中心 > 原代细胞 > 大鼠原代细胞 > 大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)
基础信息Product information
产品名称:

大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)

产品简介:

大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)公司正在出售的产品:G蛋白信号调节蛋白2抗体 EMB蛋白抗体 脑瘤相关基因抗体 大鼠冠状动脉平滑肌细胞 小鼠心脏微血管周细胞 E14小鼠胚胎干细胞 KTC-1 (人甲状腺癌细胞)

产品型号:

厂商性质:经销商

访问量:76

更新时间:2024-10-29

产品特性Product characteristics

大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)

大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)

商品属性:

组织来源

产品规格

细胞形态

货号

骨髓

5×105cells/T25细胞培养瓶

圆形、梭形、多角形,形态多样

YS-01X8101

细胞简介:

大鼠骨髓树突状分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓DC细胞是由骨髓单核细胞诱导而成的;树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞,典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长,在GM-CSFIL4的作用下形成葡萄串样集落,细胞大而形态不规则,表面皱褶多,亦可见少量短刺状突,胞内细胞器丰富并可见吞噬泡,具有较强的迁移能力,伴随有部分未诱导成的单核细胞,贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成,多数呈悬浮生长, 细胞呈圆形,细胞体积进一步增大,表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 ),伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志,主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80CD86等共刺激分子,进而激活T淋巴细胞,诱导免疫应答,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节;未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力,但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答,不能激活T细胞的信号,可导致T细胞无能,从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80CD86MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低,一般在30%以下。

原代细胞的培养条件:

  一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养

  1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;

  2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;

  3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;

  4、 胎牛血清浓度为10%-80%

  5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;

  6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;

  7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;

  8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。

  二、悬浮细胞培养

  1、原代培养时要尽量去除红细胞;

  2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;

  3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;

  4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;

  5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;

  6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。

方法简介:

实验室分离的大鼠骨髓未成熟DC采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来,细胞总量约为5×10cells/瓶。

质量检测:

实验室分离的大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)CD86免疫荧光鉴定、细胞形态等综合鉴定,纯度可达80%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息:

培养基:含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:半贴壁半悬浮

细胞形态:圆形、梭形、多角形,形态多样

传代特性:属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群

消化液:0.25%

培养条件:气相:空气,95%CO25%

大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)

细胞传代及冻存:

细胞传代步骤细胞冻存步骤
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

原代细胞的培养方法一般有以下4种:

  ① 组织块培养法

  组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

  ② 消化培养法

  ③ 悬浮细胞培养法

  对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

  ④器官培养

  器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。

大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)


公司正在出售的产品:

质粒小量提取试剂盒   Plasmid Exaction Kit

高度质粒小量提取试剂盒   High purity Plasmid Exaction Kit

质粒中量提取试剂盒   Plasmid Exaction Kit

高度质粒中量提取试剂盒   High purity plasmid exact Kit

猪α葡萄糖苷酶(α-Glu)试剂盒

Human ai ierferon alpha (IFN alpha -Ab) aibody ELISA Kit 人抗α干扰素抗体(IFNα-Ab)试剂盒

Porcineierleukin4,IL-4ELISAKit 猪白介素4(IL-4)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAhCGAb(Humanai-chorionicgonadoopin-aibody)ELISAKit人抗染色体抗体

血液牛病毒性腹泻病毒II(BovineViralDiarrhoeaVirus-2;BVDV-2)定性试剂盒20

MouseTumornecrosisfactorsolublereceptor,TNFsR-ELISAKit小鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-)试剂盒

AF680标记的骨桥蛋白抗体

耳聋常染色体显性遗传相关蛋白1抗体

HAVCR1重组食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein

MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells 0.5mgMTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又称:MYC 致癌基因(抗原)

SIRT1重组人 SIRT1 / SIR2L1 蛋白 (His 标签) Protein

AHSP Protein Human 重组人 AHSP / ERAF 蛋白

SHH Protein Mouse 重组小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (His 标签)

MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells 0.5mgMTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又称:MYC 致癌基因(抗原)

AHSP Protein Human 重组人 AHSP / ERAF 蛋白

HAVCR1重组食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein

SHH Protein Mouse 重组小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (His 标签)

SIRT1重组人 SIRT1 / SIR2L1 蛋白 (His 标签) Protein

大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA 试剂盒

Rat ai cardiolipin aibody IgA (ACA-IgA) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)试剂盒

Humahioredoxieductase,xRELISAKit 人硫氧还蛋白还原酶(xR)试剂盒 进口分装

HumanaibodytogroupAseptococcalpolysaccharide,ASP试剂盒人A组链球菌菌壁多糖抗体(ASP)试剂盒

植物过氧化氢酶(CATALASE)过氧化活性比色法定量试剂盒20

Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit人α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)试剂盒


留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

上一篇:大鼠骨髓树突状细胞(DC细胞)

下一篇:大鼠骨外膜细胞

在线客服 联系方式 二维码

服务热线

021-59989018

扫一扫,关注我们