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更新时间:2024-10-29
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:大鼠骨细胞
组织来源:骨组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
大鼠骨分离自骨组织;骨组织的细胞成分包括骨原细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞。只有骨细胞存在于骨组织内,其他三种细胞均位于骨组织的边缘。骨细胞(Osteocyte)是人体骨骼中最主要的细胞成分。在成年人骨骼中,骨细胞占细胞总数量的90%~95%,大约是成骨细胞数量的20倍。骨细胞生长在骨骼内部的骨基质中。骨细胞的细胞体呈梭形或类圆形,位于基质构成的骨陷窝内。与神经细胞类似,每个骨细胞具有大量向外延伸的突触,而这些突触均位于由骨基质构成的骨小管结构中。通过这些突触,骨细胞能够与骨表面的细胞、周围其它的骨细胞进行“交流"。普遍认为,骨细胞起源于成骨细胞。在骨形成的终末阶段,成骨细胞将可能有3种不同的归宿:分化成为骨细胞、转移至骨表面成为暂不活动的成骨细胞、进入程序死亡过程(凋亡)。骨细胞为扁椭圆形多突起的细胞,核亦扁圆、染色深。胞质弱嗜碱性。电镜下,胞质内有少量溶酶体、线粒体和粗面内质网,高尔基复合体亦不发达。骨细胞夹在相邻两层骨板间或分散排列于骨板内。相邻骨细胞的突起之间有缝隙连接。在骨基质中,骨细胞胞体所占据的椭圆形小腔,称为骨陷窝,其突起所在的空间称骨小管。相邻的骨陷窝借骨小管彼此通连。骨陷窝和骨小管内均含有组织液,骨细胞从中获得养分。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠骨采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠骨经骨钙素免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
公司正在出售的产品:
质粒大量提取试剂盒 5T
PlasmidMaxiKit 10T
质粒中量提取试剂盒 50T
PlasmidMidiKit 100T
猪α干扰素(IFN-α)ELISA 试剂盒
Human ai albumin aibody (AAA) ELISA Kit 人抗白蛋白抗体(AAA)试剂盒
PorcineIerleukin6,IL-6ELISAKit 猪白介素6(IL-6)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAHA(Humanai-Histoneaibody)ELISAKit人抗组蛋白抗体
血液牛病毒性腹泻病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定量PCR扩增试剂盒20次
MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKit小鼠坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)试剂盒
AF750标记的雌激素受体α抗体
泛素蛋白连接酶J2抗体
IGFBP4重组人 IGFBP4 蛋白 (His 标签) Protein
视网膜母细胞瘤蛋白1(RB1)重组蛋白 Recombinant Retinoblastoma Protein 1 (RB1)
HIST2H4A重组人 Histone H4 / HIST2H4A 蛋白 Protein
AGRP Protein Human 重组人 AgRP / AGRP 蛋白 (His 标签)
HA Protein H5N8 重组甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
视网膜母细胞瘤蛋白1(RB1)重组蛋白 Recombinant Retinoblastoma Protein 1 (RB1)
AGRP Protein Human 重组人 AgRP / AGRP 蛋白 (His 标签)
IGFBP4重组人 IGFBP4 蛋白 (His 标签) Protein
HA Protein H5N8 重组甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
HIST2H4A重组人 Histone H4 / HIST2H4A 蛋白 Protein
大鼠骨细胞小鼠解偶联蛋白1(UCP1)ELISA 试剂盒
Rat ai cardiolipin aibody IgM (ACA-IgM) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)试剂盒
HumanCalreticulin,CELISAKit 人钙网蛋白(C)试剂盒 进口分装
Humanai-calmodulinspecificaibody,CaM-ab试剂盒人抗钙调素特异抗体(CAM-ab)试剂盒
植物核同糖1,5二0酸羧化/加氧酶(RUBPCase/Rubisco)加氧活性定量试剂盒20次
Humanα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit人αS转移酶(α-GST)试剂盒