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更新时间:2024-11-04
小鼠脐静脉内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脐带组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X7672 |
细胞简介:
小鼠脐静脉内皮分离自脐带组织;它是脐静脉的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构,脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘,脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠脐静脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠脐静脉内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
蔗糖测定试剂盒(紫外比色法)
γ-谷酰半胱酸合成酶(γ-GCS)测定试剂盒(速率法)
超微量ATP酶测试盒(Na+K+、Ca2+Mg2+、T-ATP酶)
总巯基(-SH)测定试剂盒
植物钙调素(CAM)ELISA 试剂盒
Human ai nuclear factor aibody (ANF) ELISA Kit 人抗核因子抗体(ANF)试剂盒
Porcineadiponectin,ADPELISAKit 猪脂联素(ADP)试剂盒 进口分装
CLIAKitforADV-IgM(HumanAdenovirusIgM)ELISAKit人腺病毒IgM
血液氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量试剂盒50次
MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)试剂盒
MAP激酶相互作用丝/苏激酶1抗体
FBXL18蛋白抗体
ICOSLG重组小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
chloramphenicol/OVA 氯偶联鸡卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶联鸡卵白蛋白蛋白
GAPDH重组人 GAPDH 蛋白 (His 标签) Protein
ACOX1 Protein Human 重组人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 标签)
LDLR Protein Mouse 重组小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 (His 标签)
chloramphenicol/OVA 氯偶联鸡卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶联鸡卵白蛋白蛋白
ACOX1 Protein Human 重组人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 标签)
ICOSLG重组小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
LDLR Protein Mouse 重组小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 (His 标签)
GAPDH重组人 GAPDH 蛋白 (His 标签) Protein
小鼠脐静脉内皮细胞大鼠钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2α)试剂盒 ,英文名: CAMK2α ELISA Kit
Rat beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 大鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)试剂盒
RatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)试剂盒 进口分装
CLIAKitforDSIP(Humandeltasleep-inducingpeptide)ELISAKit人促睡眠肽
细胞培养液抗坏血酸比色法定量试剂盒20次
RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)试剂盒
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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