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更新时间:2024-11-04
兔外周血巨噬细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
外周血 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 巨噬细胞样 | YS-01X7152 |
细胞简介:
兔外周血巨噬分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫细胞,令其对病原体作出反应。
方法简介:
公司实验室分离的兔外周血巨噬采用取外周血、通过密度梯度离心法、差速贴壁、细胞因子诱导法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔外周血巨噬经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 巨噬细胞样
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 (12mM)
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠绒毛膜β(β-CG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠脱氢表雄S7(DHEA-S7)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠脱氢表雄(DHEA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠生长调节致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human immunoglobulin G receptor Fc section III (Fc gamma R III /CD16) ELISA Kit G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)试剂盒
Humanmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 人髓0脂碱性蛋白(MBP)试剂盒 96T/48T 进口分装
EquineImmunoglobulinE,IgE试剂盒马免疫球蛋白E(IgE)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母β-(β-AMYLASE)活性DNS比色法定量试剂盒20次
MouseCoisolELISAKit小鼠(Coisol)试剂盒规格:96T/48T
AF750标记的促肾上腺皮质激素受体
热休克蛋白71抗体
NOV重组食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 Protein
IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2 0.5mgIGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2) 胰岛素样生长因子结合蛋白-2(多肽)
CCL8重组人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 标签) Protein
CNPY2 Protein Human 重组人 CNPY2 蛋白
CHODL Protein Mouse 重组小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白
IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2 0.5mgIGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2) 胰岛素样生长因子结合蛋白-2(多肽)
CNPY2 Protein Human 重组人 CNPY2 蛋白
NOV重组食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 Protein
CHODL Protein Mouse 重组小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白
CCL8重组人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 标签) Protein
兔外周血巨噬细胞大鼠极低密度脂蛋白受体(VLDLR)试剂盒 ,英文名: VLDLR ELISA Kit
Mouse tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand 1 (AIL-R1) ELISA Kit 小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(AIL-R1)试剂盒
RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 大鼠骨保护素配体(OPGL)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFDPELISAKit大鼠血纤蛋白原降解产物
细胞基质金属蛋白酶(MMP-3)活性荧光定量试剂盒20次
ratNoradrenaline,NAELISAKit大鼠去甲(NA)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行