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更新时间:2024-10-31
兔睾丸间质细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
睾丸 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7879 |
细胞简介:
兔睾丸间质分离自睾丸组织;睾丸间质细胞成群分布在曲精小管之间,胞体呈圆形,椭圆形或不规则形,胞体较大,直径约20μm,胞质呈嗜酸性,细胞核呈圆形或卵圆形,常位于中央,染色较淡,有1-2个核仁线粒体多,呈管嵴状,无分泌颗粒。从青春期开始,睾丸间质细胞受垂体前叶嗜碱性细胞分泌的间质细胞刺激素(黄体生成素)的作用,能合成分泌雄性激素,可促进的发生和男性生殖器官发育,以及维持性征和性功能。
方法简介:
实验室分离的兔睾丸间质采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔睾丸间质经3β-HSD免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态优良
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠白介素 -18 (mouse IL-18) 作用: ELISA 规格: 96T 美国 Biosource
小鼠白细胞抑制因子 (mouse LIF) 作用: ELISA 规格: 96T 美国 R&D
小鼠淋巴细胞趋化因子 (mouse Lymphotactin) 作用: ELISA 规格: 96T
小鼠单核细胞趋化蛋白 -1 (mouse MCP-1) 作用: ELISA 规格: 96T 奥地利 Bender
小鼠坏死因子相关凋亡诱导配体3(AIL-R3)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human ai cardiolipin aibody IgA (ACA-IgA) ELISA Kit 人抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)试剂盒
Humandopachrometaomerase,DTELISAKit 人多巴色素异构酶(DT)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforACA(Mouseai-cenolandcenosomeaibody)ELISAKit小鼠抗中性粒/中心体抗体
一步法胶回收试剂盒20次
MouseorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit小鼠孤腓肽(OFQ/N)试剂盒规格:96T/48T
LIMD2蛋白抗体
钾离子通道Kir2.1抗体
EFNB1重组小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 Protein
APP695-770 (Amyloid protein precursor 0.5mgAPP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀粉样肽前体蛋白(多肽抗原)
MS4A1重组人 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 标签) Protein
ERN1 Protein Human 重组人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 标签)
CNTN3 Protein Rat 重组大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白
白介素1α(IL1α)重组蛋白 Recombinant Interleukin 1 Alpha (IL1a)
ERN1 Protein Human 重组人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 标签)
SMPD1重组小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 Protein
IFNAR1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (Fc 标签)
CPNE1重组人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 Protein
兔睾丸间质细胞大鼠免疫球蛋白样EGF样域酪酸激酶1(Tie1)试剂盒 ,英文名: Tie1 ELISA Kit
Mouse insulin receptor beta (ISR- beta) ELISA Kit 小鼠胰岛素受体β(ISR-β)试剂盒
RatCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 大鼠(Cyt-C)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforGFAP(Humanglialfibrillaryacidicprotein)ELISAKit人神经胶质纤维酸性蛋白
细胞甘油激酶(Glycerolkinase)活性酶连续反应比色法定量试剂盒20次
RatSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit大鼠可溶性CD40配体(sCD40L)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。