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更新时间:2024-10-30
人外周血树突状细胞(DC细胞)
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
外周血 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 树突状 | YS-01X7542 |
细胞简介:
人外周血DC分离自外周血,由外周血单核细胞诱导而成的;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。DC细胞,全称树突状细胞(DC),是近年来倍受们关注的专职抗原呈递细胞(APC),能摄取、加工及呈递抗原,启动T细胞介导的免疫反应。由美国学者Steinman于1973年在淋巴结中发现,从脾脏中分离出一类与粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞形态和功都不同的白细胞,因其细胞膜向外伸出,形成与神经细胞轴突相似的膜性树状突起,故而命名为树突状细胞。未成熟DC具有较强的迁移能力,成熟DC能有效激活初始型T细胞,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。
方法简介:
公司实验室分离的人外周血DC采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人外周血树突状细胞(DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 半贴半悬浮
细胞形态 树突状
传代特性 属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
豚鼠端粒酶试剂盒 豚鼠端粒酶试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠端粒酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠端粒酶试剂盒、豚鼠端粒酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
豚鼠单核细胞趋化蛋白4试剂盒 豚鼠单核细胞趋化蛋白4试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠单核细胞趋化蛋白4试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠单核细胞趋化蛋白4试剂盒、豚鼠单核细胞趋化蛋白4eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
豚鼠促卵泡素试剂盒 豚鼠促卵泡素试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠促卵泡素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠促卵泡素试剂盒、豚鼠促卵泡素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
豚鼠表皮生长因子试剂盒 豚鼠表皮生长因子试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠表皮生长因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠表皮生长因子试剂盒、豚鼠表皮生长因子eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠促甲状腺素释放激素(H)ELISA 试剂盒
Human glycated albumin (GA) ELISA Kit 人糖化白蛋白(GA)试剂盒
HumanHomocysteicacid,HcyELISAKit 人同型半胱(Hcy)试剂盒 进口分装
HumanBence-Jonesprotein,BJP试剂盒人本周蛋白(BJP)试剂盒
植物种子活性叶绿体分离试剂盒20次
Humaarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit人抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)试剂盒
自然杀伤凝集素样受体G2抗体
表皮生长因子受体III型突变体抗体
CA9重组小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白 (His 标签) Protein
ATF1 (Activating Transcription Factor1 0.5mgATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化复制因子1
CCL24重组人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 标签) Protein
FLT1 Protein Human 重组人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 (His 标签)
CD302 Protein Rat 重组大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白
ATF1 (Activating Transcription Factor1 0.5mgATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化复制因子1
FLT1 Protein Human 重组人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 (His 标签)
CA9重组小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白 (His 标签) Protein
CD302 Protein Rat 重组大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白
CCL24重组人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 标签) Protein
人外周血树突状细胞(DC细胞)大鼠神经纤维网蛋白1(P1)试剂盒 ,英文名: P1 ELISA Kit
Mouse cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 小鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)试剂盒
Rat25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISAKit 大鼠25羟D3(25(OH)D3/25HVD3)试剂盒 进口分装
CLIAKitforHBeAg(立可读)乙型肝e抗原
细胞半胱(cysteine)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次
Reatserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit大鼠丝/苏蛋酸酶(STK)试剂盒
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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