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更新时间:2024-10-30
人肾动脉内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肾组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X7259 |
细胞简介:
人肾动脉内皮分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾动脉的分支为叶间动脉,穿行于肾柱内,上行至皮质与髓质交界处,形成与肾表面平行的弓状动脉。小叶间动脉向被膜发出毛细血管,并向周围的肾小体发出入球小动脉,进入肾小囊后形成球形的毛细血管网,再汇集成出球小动脉,出肾小体。直小动脉分支形成毛细血管网,再汇合成直小静脉,入弓状静脉、叶间静脉,最后汇合成肾静脉经肾门出肾,注入下腔静脉。肾动脉既是肾的营养血管,又是肾的机能血管,与肾泌尿机能密切相关。肾动脉在肾实质内形成两个毛细血管网:肾小球毛细血管网,血压较高,利于血浆滤过形成原尿;球后毛细血管网,血压较低,利于肾小管的重吸收。肾动脉内皮细胞是肾动脉的重要结构细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。肾动脉内皮细胞主要功能有:①在血浆滤过形成原尿的过程中起重要作用,②在肾小管的重吸收过程中起重要作用,③保持凝血和纤溶的动态平衡。
方法简介:
公司实验室分离的人肾动脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人肾动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit ELISA.
小鼠脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISAKit ELISA.
小鼠交联物(PY)ELISAKit ELISA.
小鼠骨桥素(OPN)ELISAKit ELISA.
小鼠干细胞因子受体(SCFR)ELISA 试剂盒
Human aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 人水通道蛋白1(AQP-1)试剂盒
HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 人Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)试剂盒 进口分装
Humanapelin12,AP12试剂盒人apelin12(AP12)ELISAKi
植物氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量试剂盒50次
HumaotalproteinS,TPSELISAKit人总蛋白S(TPS)试剂盒
胰岛细胞自身抗原相关蛋白PTPRN2抗体
PE标记小鼠CD154单克隆抗体
FCGR2重组小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated Protein
ADAMTS7 peptide/HRP 辣根过氧化物酶标记整合素样金属蛋白酶与1型-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP 辣根过氧化物酶标记整合素样金属蛋白酶与1型-7抗原
TFAP2C重组人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 标签) Protein
FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 标签)
CD14 Protein Rat 重组大鼠 CD14 蛋白
次0酸核糖基转移酶1(HPRT1)重组蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)
FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 标签)
S100A9重组小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 标签) Protein
IFNAR1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 标签)
ALOX15B重组人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein
人肾动脉内皮细胞大鼠髓鞘关联糖蛋白(MAG)试剂盒 ,英文名: MAG ELISA Kit
Mouse glycogen phosphorylase II (GP-II) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)试剂盒
raesistinELISAKit 大鼠抵抗素(Resistin)试剂盒 进口分装
CLIAKitforHIT(Humanheparinassociatedaibody)ELISAKit人抗肝素PF4复合物抗体/HIT抗体
细胞RCT激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKit5-大鼠5核苷酸酶
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。