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更新时间:2024-10-29
大鼠浦肯野细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
小脑组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 神经元细胞样 | YS-01X7739 |
细胞简介:
大鼠浦肯野分离自小脑皮质组织;小脑的表面被覆着一层灰质,叫小脑皮质,小脑皮质分为3层,从表及里分别为分子层、浦肯野细胞层和颗粒细胞层。皮质里含有星状细胞、篮状细胞、浦肯野细胞、高尔基细胞和颗粒细胞等5种神经元。浦肯野细胞发出的轴突组成小脑皮质的传出纤维,终止于小脑白质内的神经核。浦肯野细胞(Purkinje cell)是从小脑皮质发出的能够传出冲动的神经元。人的小脑皮质约有1500万个浦肯野细胞。浦肯野细胞还广泛分布于心室。显著的电生理特点是传导性强,传导速度快,可达4000mm/s。属快反应自律型细胞,具有舒张期自动除极化的性能,因而有自律性,但自律性强度明显低于窦房结P细胞。这类细胞常常平行排列,细胞内电阻低,只有心室细胞的1/3。小脑:浦肯野细胞是小脑皮质中最大的神经元,细胞体呈梨形,顶端发出2~3条粗大的主树突,向外伸入分子层。主树突沿途分支繁茂,形如展开的、扁薄的扇形,铺展在与小脑叶片长轴垂直的平面上。树突分支上有大量的树突棘,与传入纤维构成广泛的突触联系,接受传入小脑的全部信息。轴突由细胞底部(与主树突相对方向)发出,细长,离开胞体不远便形成有髓神经纤维,向内经颗粒层离开皮质进入白质,组成小脑皮质的传出纤维,终止于小脑内部的神经核团。一个浦肯野细胞的轴突约形成500个终末膨大,约与小脑深部核团的35个神经元形成突触。心脏浦肯野细胞常常平行排列,几个细胞互相以浆膜连接排成一个小束,小束外包绕着基底膜。细胞内含肌原纤维很少,胞浆区内充满糖原颗粒、线粒体和肌浆网,细胞内电阻低,只有心室细胞的1/3。浦肯野细胞内无横管系统,但膜电容比收缩细胞大,可能是由于其闰盘结构广泛而复杂,提供了较大的表面积的缘故。浦肯野细胞闰盘的主要成分是缝隙连接,粒着膜占的比例很少,这些可能是构成浦肯野细胞传导快的形态学基础。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠浦肯野采用消化法结合神经元专用培养基、化学试剂抑制法筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶
质量检测:
公司实验室分离的大鼠浦肯野经Neph3免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含脂质浓缩液、BSA、Monothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 神经元细胞样
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
人粘蛋白21(MUC21)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MUC21 (Mucin 21) ELISA Kit
人伴侣蛋白10(CPN10)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CPN10 (Chaperonin 10) ELISA Kit
人趋化素(CHEM)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CHEM(Chemerin) ELISA Kit
人趋化因子C-C-基元配体1(CCL1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CCL1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit
豚鼠白介素2(IL-2)试剂盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit
Human ubiquitin decomposition enzyme (DUB) ELISA Kit 人泛素分解酶(DUB)试剂盒
RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit 兔子白介素3(IL-3)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforBeta-DFELISAKit大鼠β-防御素
细菌样品二维电泳裂解液用于细菌蛋白二维电泳
RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)试剂盒规格:96T/48T
PRDM锌指转录因子PRDM13抗体
淋巴细胞性白血病相关序列1抗体
SELL重组小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein
CD31 (PECAM-1 0.5mgCD31 (PECAM-1) 血小板内皮细胞黏附分子-1(抗原)
CCL11重组人 CCL11 蛋白 Protein
ISG15 Protein Human 重组人 ISG15 / G1P2 蛋白
SELP Protein Rat 重组大鼠 SELP / P Selectin 蛋白 (Fc 标签)
CD31 (PECAM-1 0.5mgCD31 (PECAM-1) 血小板内皮细胞黏附分子-1(抗原)
ISG15 Protein Human 重组人 ISG15 / G1P2 蛋白
SELL重组小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein
SELP Protein Rat 重组大鼠 SELP / P Selectin 蛋白 (Fc 标签)
CCL11重组人 CCL11 蛋白 Protein
大鼠浦肯野细胞兔子端粒酶(TE)ELISA 试剂盒
Human ichinella aibody (ichinella Ab) ELISA Kit 人旋毛虫抗体(ichinella Ab)试剂盒
Humanai-lymphocytotoxicaibody,ALA/LCAELISAKit 人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanEpidermalgrowthfactor,EGF试剂盒人表皮生长因子(EGF)试剂盒规格:96T/48T
组织PLK3激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
HumanPancreaticAmylase,PAMYELISAKit人胰(PAMY)试剂盒规格:96T/48T
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