小鼠尾动脉内皮细胞

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更新时间：2024-11-07

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产品名称：小鼠尾动脉内皮细胞

组织来源：尾动脉

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

培养信息：

包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基：基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠尾动脉内皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞简介：

小鼠尾动脉内皮分离自尾动脉组织；尾动脉是鼠尾的主要血管，尾部主要大血管分布表浅，尾侧静脉适于注射给药，尾正中动脉适于动脉采血、练习显微外科血管吻合技术等，实际应用相当普遍。许多动物模型也使用鼠尾。鼠尾部血管丰富，供血来源于荐中动脉和臀上动脉两个动脉，形成尾椎节段性分布和纵向贯通分布相结合的特点，尾部浅层 3 套纵向动静脉系统，鼠尾背侧为不规则动静脉链状结构，深层血管与浅层血管双层笼状以每节脊椎为单位沟通，且呈动静脉血管径不匹配的特点。通过研究发现鼠尾存在两套血源: 荐中动脉和臀上动脉。其在尾部依尾横动脉形成沟通。尾横动脉呈尾椎节段性分布，直接沟通尾正中动脉、尾深动脉和皮支。在尾部被横断后，可以保持损伤节段以上尾椎的动静脉回流通路; 鼠尾存在动静脉口径明显不规范的现象: 尾外侧静脉明显大于伴随的动脉，而正中动脉明显大于伴随的静脉，形成供血主要来自腹面的尾正中动，回血主要依靠两侧的尾侧静脉，符合腹面动脉保护的安全性，同时利于血管散热，尾横动脉提供了不同血源体系的沟通渠道。参考文献[王蕾，叶明霞.大鼠尾部血管的解剖结构与鼠尾的生理功能探讨]。

方法简介：

实验室分离的小鼠尾动脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的小鼠尾动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养步骤：

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
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DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受体-D1抗原

ENTPD3 Protein Human 重组人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白

CDH13重组大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein

C Protein Mouse 重组小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白

IL16重组人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein

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收到细胞如何处理？

1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。

2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。

6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作