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更新时间:2024-11-05
兔卵泡膜细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
卵巢 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8390 |
细胞简介:
兔卵泡膜分离自卵巢组织;卵巢是雌性动物的生殖器官,卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同,仅左侧发育(右侧已退化),呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡,卵泡呈黄色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢,但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构,而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官,它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、淋巴管和神经。哺乳动物的卵巢内卵泡的发育需要相关激素的调节才能完成,垂体素(卵泡刺激素和黄体生成素)使原始卵泡开始发育,其过程中还产生大量的雌激素。雌激素是卵巢的颗粒细胞和卵泡膜细胞在垂体素的作用下协同合成的,卵泡膜细胞合成的雄激素透过基膜进入颗粒细胞,并转变为雌激素。因此,卵泡膜细胞在生殖内分泌调节中占有关键的位置,了解其在病理及生理中的作用,对于与性激素有关的妇产科疾病(如多囊卵巢综合症、卵巢癌等)的研究有着重要意义。在哺乳动物卵泡生长发育的过程中,卵母细胞由不断增加的颗粒细胞层包裹。卵巢组织中的膜细胞作为卵泡的外层细胞可以维持卵泡结构的完整性,参与构成卵母细胞和颗粒细胞发育的微环境且为类固醇激素的生成提供底物。在哺乳动物中调节膜细胞类固醇激素生成的机制已见相关报道,但是有关卵泡膜细胞的聚集、生长和分化的研究尚不深入。
方法简介:
实验室分离的兔卵泡膜采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔卵泡膜经3β-HSD免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔卵泡膜体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠氧化型试剂盒 小鼠氧化型试剂盒 小鼠氧化型试剂盒,,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠氧化型试剂盒、小鼠氧化型试剂盒
小鼠试剂盒试剂盒 小鼠试剂盒 小鼠试剂盒,,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠试剂盒、小鼠试剂盒试剂盒
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小鼠活化素试剂盒 小鼠活化素试剂盒 小鼠活化素试剂盒,,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠活化素试剂盒、小鼠活化素试剂盒
DNA修复蛋白GIYD2抗体
低密度脂蛋白受体相关蛋白5+6抗体
MFI2重组小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白 Protein
半乳糖凝集素3(GAL3)重组蛋白 Recombinant Galectin 3 (GAL3)
IL11重组人 IL11 / Interleukin 11 / IL-11 蛋白 Protein
CD44 Protein Human 重组人 CD44 蛋白
SIRPG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 (Fc 标签)
AMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1 0.5mgAMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1) 腺苷单0酸活化蛋白激酶β1抗原
CD44 Protein Human 重组人 CD44 蛋白
FOLR1重组小鼠 FOLR1 / FR-alpha 蛋白 Protein
LILRA5 Protein Rat 重组大鼠 LILRA5 蛋白
FCGR2A重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 标签) Protein
小鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1)ELISA pcr检测试剂盒
Human cryoglobulin (CG) ELISA Kit 人冷球蛋白(CG)试剂盒
Humanmethoexate,MTXELISAKit 人喋呤(MTX)pcr检测试剂盒分装
BombyxmoriLivetin,LT试剂盒家蚕卵黄蛋白(LT)试剂盒规格:96T/48T
A含量比色法定量试剂盒20次
MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISAKit小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)试剂盒规格:96T/48T
兔卵泡膜细胞大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP1)试剂盒 ,英文名: MCP1 ELISA Kit
Podocin ELISA Kit 人Podocin 试剂盒
Ratiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit 大鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)pcr检测试剂盒分装
CLIAKitforcTn-I(RabbitcardiacoponinI)ELISAKit兔心肌肌钙蛋白Ⅰ
细胞糖类总量铁比色法定量试剂盒20次
Ratepidermalgrowthfactorreceptor,EGFRELISAKit大鼠表皮生长因子受体(EGFR)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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