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更新时间:2024-11-04
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产品名称:兔气管平滑肌细胞
组织来源:气管
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态优良
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
兔气管平滑肌分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C"字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜,表面覆盖纤毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒,纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出,以净化吸入的气体。气管平滑肌是气管的重要结构组成之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用;能够保持气道张力,维持气道管状形态,从而有利于气体流通,保持肺部通气。气管平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。气管平滑肌细胞的异常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是气道重塑的关键。
方法简介:
公司实验室分离的兔气管平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔气管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品:
生长分化因子-3 英文名称: growth differeiation factor 3 规格: 英文缩写: GDF-3
胶质纤维酸性蛋白 英文名称: glial fibrillary acidic protein 规格: 英文缩写: GFAP
生长激素释放多肽Ghrelin 英文名称: peptide hormone Ghrelin 规格: 英文缩写: Ghrelin
胰高血糖素 英文名称: Glucagon 规格: 英文缩写: GC
豚鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 大鼠信号转导分子7(Smad7)试剂盒
HumancytosolicphospholipaseA2,cPLA2ELISAKit 人胞浆型0脂酶A2(cPLA2)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humancrystalproteinsβ,Cryβ试剂盒人晶体蛋白β(Cryβ)试剂盒规格:96T/48T
组织EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性试剂盒20次
HumanProstaglandinDSyhase,PGDSELISAKit人前列腺素D合成酶(PGDS)试剂盒规格:96T/48T
白细胞介素-19抗体
酶2抗体
HA重组甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PACAP(6-38 Peptide 0.5mgPACAP(6-38 Peptide) 腺苷酸环化酶激活肽6-38
LILRB3重组人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 Protein
IL12A & IL27B Protein Human 重组人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白
ACE2 Protein Human 重组人 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 标签)
PACAP(6-38 Peptide 0.5mgPACAP(6-38 Peptide) 腺苷酸环化酶激活肽6-38
IL12A & IL27B Protein Human 重组人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白
HA重组甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
ACE2 Protein Human 重组人 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 标签)
LILRB3重组人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 Protein
兔气管平滑肌细胞大鼠抗存活素抗体(Ai-Surv)试剂盒 ,英文名: Ai-Surv ELISA Kit
Monkey adrenomedullin (ADM) ELISA Kit肾上腺髓质素(ADM)试剂盒
RatCompleme4,C4ELISAKit 大鼠补体蛋白4(C4)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFree-T3(HumanFreei-iodothyronineIndes)ELISAKit人游离三甲状腺原
细胞活化10(FACTORXa)活性荧光定量试剂盒20次
Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)试剂盒规格:96T/48T
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作