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更新时间:2024-10-31
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产品名称:人子宫成纤维细胞
组织来源:子宫组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态优良
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
人子宫成纤维分离自子宫组织;子宫是孕育胎儿的器官,位于盆腔中部,膀胱与直肠之间,其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持,这些结构受损或松弛时,可以引起子宫脱垂。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的子宫成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。子宫成纤维细胞的主要特征:①是子宫的重要细胞组成,在体外易于培养;②在子宫损伤后能修复和重塑子宫;③在子宫炎症时能有效控制炎症扩散。
方法简介:
公司实验室分离的人子宫成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人子宫成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品:
小鼠型纤溶酶原激活物受体 英文名称: urokinase-plasmingen activator receptor 规格: 英文缩写: uPA-R
小鼠超敏感度促甲状腺素 英文名称: Mouse ulasensitive Thyroid Stimulating Hormone 规格: 英文缩写: U.TSH
线粒体解偶联蛋白2 英文名称: Mouse Mitochondrial Uncoupling Protein 2 规格: 英文缩写: UCP2
小鼠血管细胞粘附分子-1 英文名称: vascuiar endothelial cells adhesion molecule 1 规格: 英文缩写: VCAM-1
小鼠绒毛膜β(β-CG)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human brain g peptide (BGP/Gehrelin) ELISA Kit 人脑肠肽(BGP/Gehrelin)试剂盒
Humanvionectin,VELISAKit 人玻连蛋白/体外粘连蛋白(VN/CD51+CD61)试剂盒 96T/48T 进口分装
guineapigImmunoglobulinA,IgA试剂盒豚鼠免疫球蛋白A(IgA)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量试剂盒20次
Mousecardioophln1,CT-1ELISAKit小鼠心肌营养素1(CT-1)试剂盒规格:96T/48T
FAM160B1蛋白抗体
过氧化氢异构酶ALOXE3抗体
CD200重组人 CD200 / OX-2 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
粒细胞集落刺激因子(GCSF)重组蛋白 Recombinant Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)
PSMA3重组人 PSMA3 / Proteasome 20S alpha 3 蛋白 Protein
CPB2 Protein Human 重组人 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白
NP Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP)
粒细胞集落刺激因子(GCSF)重组蛋白 Recombinant Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)
CPB2 Protein Human 重组人 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白
CD200重组人 CD200 / OX-2 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
NP Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP)
PSMA3重组人 PSMA3 / Proteasome 20S alpha 3 蛋白 Protein
人子宫成纤维细胞大鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶4(NOX4)试剂盒 ,英文名: NOX4 ELISA Kit
Mouse thrombopoietin (TPO) ELISA Kit 小鼠血小板生成素(TPO)试剂盒
RatcoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit 大鼠Ⅹ(FⅩ)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforGM1(Humanai-gangliosideaibody)ELISAKit人抗抗体
细胞二脂酰甘油(DAG)含量酶连续循环反应比色法定量试剂盒20次
RatSubstanceP,SPELISAKit大鼠P物质(SP)试剂盒规格:96T/48T
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
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