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更新时间:2024-10-30
人气管上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
气管 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7035 |
细胞简介:
人气管上皮分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C"字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜,表面覆盖纤毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒,纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出,以净化吸入的气体。气管上皮是气道与外界环境接触的道防线,不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞,还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性,因此,在基础及临床研究中极为重要。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人气管上皮采用-混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人气管上皮经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔载脂蛋白B100(apo-B100)试剂盒 96T/48T
兔载脂蛋白A1(apo-A1)试剂盒 96T/48T
兔诱导型合成酶(iNOS)试剂盒 96T/48T
兔抑瘤素M(OSM)试剂盒 96T/48T
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 人2(VD2)试剂盒
HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 人相关血浆蛋白A(PAPP-A)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAF试剂盒人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)试剂盒规格:96T/48T
桌面DNA清除溶液500毫升
Humansecretorycompone,SCELISAKit人分泌成分(SC)试剂盒规格:96T/48T
锌指蛋白258抗体
KB抑制蛋白激酶α/β抗体
PTPRC重组小鼠 CD45 / PTPRC 蛋白 (Fc 标签) Protein
肝细胞癌相关蛋白1(HCRP1)重组蛋白 Recombinant Hepatocellular Carcinoma Related Protein 1 (HCRP1)
BTC重组人 BTC / Betacellulin 蛋白 Protein
GRK6 Protein Human 重组人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 标签)
SFTPD Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 SFTPD / SP-D / SFTP4 蛋白
HtrA丝肽酶4(HTRA4)重组蛋白 Recombinant HtrA Serine Peptidase 4 (HTRA4)
GRK6 Protein Human 重组人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 标签)
IFNA4重组小鼠 IFNA4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 标签) Protein
PVR Protein Rat 重组大鼠 CD155 / PVR / NECL5 蛋白
TMEM27重组人 TMEM27 蛋白 (Fc 标签) Protein
人气管上皮细胞大鼠吻素1(KISS1)试剂盒 ,英文名: KISS1 ELISA Kit
Mouse aquaporin 0 (AQP-0) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白0(AQP-0)试剂盒
MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit 小鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯(AcSDKP)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHSF1(MouseHeatShockFactor1)ELISAKit小鼠热休克因子1
细胞NADPH还原酶(NADPHCytochromeCReductase)活性高质敏感比色法定量试剂盒20次
ELISAKitIFI16/p16大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16