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更新时间:2024-10-30
人气管平滑肌细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
气管 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7063 |
细胞简介:
人气管平滑肌分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C"字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜,表面覆盖纤毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒,纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出,以净化吸入的气体。气管平滑肌是气管的重要结构组成之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用;能够保持气道张力,维持气道管状形态,从而有利于气体流通,保持肺部通气。气管平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。气管平滑肌细胞的异常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是气道重塑的关键。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人气管平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人气管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
豚鼠内皮素1(ET-1)试剂盒 96T/48T
豚鼠免疫球蛋白G(IgG)试剂盒 96T/48T
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)试剂盒 96T/48T
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)试剂盒 96T/48T
小鼠催产素(OT)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat coagulation factor XII (F XII) ELISA Kit 大鼠Ⅻ(FⅫ)试剂盒
HumanComplemefragme5a,C5aELISAKit 人补体片断5a(C5a)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6试剂盒人碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)试剂盒规格:96T/48T
植物脂质过氧化氢(H2O2)活性比色法定量试剂盒20次
Humaestoteronerecepter,ELISAKit人睾同受体()试剂盒规格:96T/48T
锌指蛋白186抗体
Irx3蛋白抗体
ERBB2重组大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白 Protein
HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1 0.5mgHMGB1 (High Mobility Group Box protein 1) 高迁移率族蛋白-1(抗原)
IL9重组人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein
FKBP7 Protein Human 重组人 PPIase / FKBP7 蛋白
TFPI2 Protein Mouse 重组小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白
HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1 0.5mgHMGB1 (High Mobility Group Box protein 1) 高迁移率族蛋白-1(抗原)
FKBP7 Protein Human 重组人 PPIase / FKBP7 蛋白
ERBB2重组大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白 Protein
TFPI2 Protein Mouse 重组小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白
IL9重组人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein
人气管平滑肌细胞大鼠吻素受体(KISS1R)试剂盒 ,英文名: KISS1R ELISA Kit
Mouse dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 小鼠双氢睾酮(DHT)试剂盒
MouseSmad7ELISAKit 小鼠信号转导分子7(Smad7)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHSL(Humanhormonesensitivelipase)ELISAKit人激素敏感性脂肪酶
细胞NADPH还原酶(NADPHCytochromeCReductase)活性比色法定量试剂盒20次
ELISAKitOrexinA大鼠阿立新A
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