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更新时间:2024-10-30
人Ⅱ型肺泡上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肺组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7622 |
细胞简介:
人Ⅱ型肺泡上皮分离自肺组织;肺泡由单层上皮细胞构成的半球状囊泡。肺中的支气管经多次反复分枝成无数细支气管,它们的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即为肺泡。小肺泡细胞,又称I型肺泡细胞,厚约0.1微米,基底部是基底膜,无增殖能力。大肺泡细胞,又称Ⅱ型肺泡细胞,分泌表面活性物质(二棕榈酰脂),以降低肺泡表面张力。Ⅱ型肺泡细胞位于Ⅰ型肺泡细胞之间,数量较Ⅰ型肺泡细胞多,但覆盖面积比Ⅰ型肺泡细胞小。细胞立方形或圆形,顶端突入肺泡腔。细胞核圆形,胞质着色浅、呈泡沫状。电镜下,细胞游离而有少量微绒毛,胞质内富含线粒体和溶酶体,有较发达的粗面内质网和高尔基复合体。核上方有较多的分泌颗粒,电子密度高、大小不等,直径约0.1-1.0μm颗粒内含有平行排列的板层状结构,称为嗜饿性板层小体。小体内的主要成分为磷脂,以二棕榈酰为主,此外还有糖胺多糖及蛋白质等。颗粒内物质释放出来后,在肺泡表面形成一层粘液层,称为表面活性物质(surfactant)。表面活性物质有降低肺泡表面张力、稳定肺泡大小的作用。呼气时肺泡缩小,表面活性物质密度增加,表面张力降低,防止肺泡过度塌陷;吸气时肺泡扩张,表面活性物质密度减小,肺泡回缩力加大,可防止肺泡过度膨胀。表面活性物质的缺乏或变性均可引起肺不张,过度通气可造成表面活性物质缺乏;吸入毒气可直接破坏表面活性物质。Ⅱ型肺泡细胞有分裂、增殖并分化为Ⅰ型肺泡细胞的潜能,故具有修复受损伤上皮的作用。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人Ⅱ型肺泡上皮采用弹性蛋白酶消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人Ⅱ型肺泡上皮经SP-C免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
(Fibrinogen) 作用: ELISA 规格: 进口分装
人 Foxp3(Foxp3) 作用: ELISA 规格: 进口分装
半乳糖凝集素 7 ( Galectin-7 ) 作用: ELISA 规格: 进口分装
胃泌素 (Gasin) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠二0酸腺苷(ADP)ELISA 试剂盒
Rat endostatin (ES) ELISA Kit 大鼠内皮抑素(ES)试剂盒
HumanactivatedcoagulationfactorⅫ,FⅫaELISAKit 人活化Ⅻ(FⅫa)试剂盒 进口分装
Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1试剂盒人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)试剂盒
植物乙醇酸氧化酶(glycolateoxidase)活性比色法定量试剂盒20次
Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAKit人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)试剂盒
磷酸化调节元件结合蛋白2抗体
血管动蛋白抗体
FCGR4重组小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 标签) Protein
Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1
FAM19A2重组人 FAM19A2 蛋白 Protein
FCGR3A Protein Human 重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 标签), Biotinylated
CLEC1A Protein Rat 重组大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白
Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1
FCGR3A Protein Human 重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 标签), Biotinylated
FCGR4重组小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 标签) Protein
CLEC1A Protein Rat 重组大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白
FAM19A2重组人 FAM19A2 蛋白 Protein
人Ⅱ型肺泡上皮细胞大鼠诱导型合酶(NOS2)试剂盒 ,英文名: NOS2 ELISA Kit
Mouse follistatin (FS) ELISA Kit 小鼠卵泡抑素(FS)试剂盒
Mousemaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAkit 小鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)试剂盒 进口分装
CLIAKitforHumanEamoebahistolyticaAigenELISAKit人痢疾内阿米巴抗原
细胞3-0酸甘油脱氢酶(GAPDH)活性酶动力比色法定量试剂盒20次
ELISAKitACV-RAb大鼠活化素A受体抗体
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