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更新时间:2024-10-29
大鼠胰腺导管上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
胰腺组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7075 |
细胞简介:
大鼠胰腺导管上皮分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。成体胰腺导管上皮细胞作为胰腺前体细胞,已证实具多向分化潜能,在合适的外源性刺激下可分化成胰岛样细胞,胰腺导管上皮细胞转分化的胰岛样细胞免疫原性如何,转分化的胰岛样细胞在治疗糖尿病时是否发生免疫排斥反应,对干细胞临床治疗糖尿病具有重要意义。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠胰腺导管上皮采用-胶原酶混合消化法结合密度梯度离心法、差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠胰腺导管上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠透明质酸(HA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)试剂盒
Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCPELISAKit 人抗环胍肽抗体(CCP)试剂盒 96T/48T 进口分装
HeneggImmunoglobulinofYolk,IgY试剂盒鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母细胞细胞壁分离试剂盒20次
mouseBeta-Endorphin,β-EPELISAKit小鼠β内啡肽(β-EP)试剂盒规格:96T/48T
肌微管素相关蛋白11抗体
细胞表面趋化因子受体6(CD196)抗体
F3重组大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 Protein
ER-alpha 雌激素受体alpha 0.5mgER-alpha 雌激素受体alpha
IGFBP6重组人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 Protein
CSF1R Protein Human 重组人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 标签)
CEACAM1 Protein Mouse 重组小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白
ER-alpha 雌激素受体alpha 0.5mgER-alpha 雌激素受体alpha
CSF1R Protein Human 重组人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 标签)
F3重组大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 Protein
CEACAM1 Protein Mouse 重组小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白
IGFBP6重组人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 Protein
大鼠胰腺导管上皮细胞大鼠肿瘤坏死因子α(TNFα)试剂盒 ,英文名: TNFα ELISA Kit
Mouse soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)试剂盒
MouseErythropoietin,EPOELISAKit 小鼠红细胞生成素(EPO)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanImmunoglobulinA,IgAELISAKitA
微型RNA(miRNA)文库构建技术试剂盒5次
ELISAKitMT大鼠金属硫蛋白