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更新时间:2024-10-29
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产品名称:大鼠神经少突胶质细胞
组织来源:脑组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
大鼠神经少突胶质分离自脑皮层组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。少突胶质细胞分布于中枢神经系统,在银浸染标本中,少突胶质细胞比星状胶质细胞小,其突起也较小而少,呈珠状,故被称为少突胶质细胞或寡突胶质细胞。但是用特异性免疫细胞化学染色显示的少突胶质细胞,其突起并不少,而且还有许多分支。少突胶质细胞的主要功能是在中枢神经系统中包绕轴突、形成绝缘的髓鞘结构、协助生物电信号的跳跃式高效传递并维持和保护神经元的正常功能。其异常不仅会导致中枢神经系统脱髓鞘病变,还会引起神经元损伤或精神类疾病,甚至可以引发脑肿瘤。根据少突胶质细胞的分布和位置可分为三种:①束间少突胶质细胞(interfasicular-oligodendrocyte),分布在中枢神经系统的白质的神经纤维束之间;②神经细胞周少突胶质细胞(perineuronal-oligodendrocyte),分布在中枢神经系统的灰质区,常位于神经细胞周围,与神经细胞的关系密切,故又称为神经细胞周卫星细胞(perineuronal-satellite-cell),但在神经细胞胞体与此类细胞之间亦常有星形胶质细胞的薄片状突起分隔;③血管周少突胶质细胞(pcrivascular-oligodendrocyte),主要分布在中枢神经系统内的血管周围。少突胶质细胞形成的髓鞘膜是最为特化和复杂动物细胞膜之一,其上有众多跨膜蛋白和表面蛋白用以维持髓鞘的致密稳定结构。如半乳糖脑苷脂(GC),它是髓鞘的一种主要类脂,用GC抗体鉴别成熟的少突胶质细胞是一种比较早的免疫鉴定方法。近十年来,神经发育学科进展较快,更多的少突胶质细胞分子标记物被鉴定出来,如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠神经少突胶质采用消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠神经少突胶质经GC(Galactocerebroside)免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
公司正在出售的产品:
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猪促卵泡素(FSH)ELISA 试剂盒
Human macrophage inflammatory protein 1 beta (MIP-1 beta /CCL4) ELISA Kit 人巨噬细胞性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)试剂盒
PorcineEsogen,EELISAKit 猪雌激素(E)试剂盒 进口分装
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MAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A 0.5mgMAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A) 微管相关蛋白1A抗原
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WIF1 Protein Mouse 重组小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 (His 标签)
MAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A 0.5mgMAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A) 微管相关蛋白1A抗原
ALOX15B Protein Human 重组人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 (His & GST 标签)
NT5E重组食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白 (His 标签) Protein
WIF1 Protein Mouse 重组小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 (His 标签)
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大鼠神经少突胶质细胞兔超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA 试剂盒
Rat alcohol dehydrogenase (ADH) ELISA Kit 大鼠乙醇脱氢酶(ADH)试剂盒
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