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更新时间:2024-10-29
大鼠神经小胶质细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脑组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7357 |
细胞简介:
大鼠神经小胶质分离自脑组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。小胶质细胞是神经胶质细胞的一种,相当于脑和脊髓中的巨噬细胞,是中枢神经系统(CNS)中的道也是最主要的一道免疫防线。小胶质细胞大约占大脑中的神经胶质细胞的20%,小胶质细胞不停地清除着中枢神经系统中的损坏的神经,斑块及感染性物质。无数临床上和理学研究表明激活的小胶质细胞在神经退化类疾病的发病机理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多发性硬化和阿兹海默症等。但是过多激活或失控的小胶质细胞会引起神经毒性。它们是促炎因子和氧化应激的重要来源,如肿瘤坏死因子(TNF),一氧化氮,白介素等有神经毒性的物质。神经小胶质细胞的主要功能:①神经胶质出现在大脑发育早期向成熟阶段转化的过程中;②当程序性细胞死亡时,或在大脑发育的过程中,中枢神经系统受损或受到病理损坏时,神经胶质可做为大脑的巨噬细胞;③胶质细胞能在Ⅱ类组织相容性复合体表达CD-4阳性T细胞时表达抗原,能进行Fc介导的巨噬作用,并且与造血细胞和巨噬细胞组织共享抗原。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠神经小胶质采用酶消化法结合差速贴壁法,在培养基营养缺失数天后经摇床震荡收集脱落细胞制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠神经小胶质经CD11b免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液(12mM)
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
猪(HYD)ELISAKit ELISA.
猪(NO)ELISAKit ELISA.
猪内皮型合成酶(eNOS)ELISAKit ELISA.
猪内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit ELISA.
猪促甲状腺素释放激素(H)ELISA 试剂盒
Human macrophage inflammatory protein 2 (MIP-2) ELISA Kit 人巨噬细胞性蛋白2(MIP-2)试剂盒
Porcinegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 猪生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAlphaActin(HumanAlpha-Actin)ELISAKit人α肌动蛋白
血液0酸二酯酶4(PDE4)活性荧光定量试剂盒10次
Mouseα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDHELISAKit小鼠α羟基脱氢酶(αHBDH)试剂盒
β晶状体蛋白B3抗体
磷酸化自噬相关蛋白9A抗体
CD3D重组食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白 (His 标签) Protein
MMP-2 基质金属蛋白酶-2(多肽抗原 0.5mgMMP-2 基质金属蛋白酶-2(多肽抗原)
CCL8重组人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 标签) Protein
ALOX15B Protein Human 重组人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白
BTLA Protein Mouse 重组小鼠 BTLA 蛋白
MMP-2 基质金属蛋白酶-2(多肽抗原 0.5mgMMP-2 基质金属蛋白酶-2(多肽抗原)
ALOX15B Protein Human 重组人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白
CD3D重组食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白 (His 标签) Protein
BTLA Protein Mouse 重组小鼠 BTLA 蛋白
CCL8重组人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 标签) Protein
大鼠神经小胶质细胞兔半胱酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA 试剂盒
Rat aldehyde dehydrogenase (ALDH) ELISA Kit 大鼠乙脱氢酶(ALDH)试剂盒
Humanskieactivefactor/inflammatoryfactor,SRF/IFELISAKit 人皮肤反应因子/性因子(SRF/IF)试剂盒 进口分装
HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-II试剂盒人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)试剂盒
组织蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量试剂盒20次
Humanmonocytechemotacticprotein2,MCP-2ELISAKit人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)试剂盒
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