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更新时间:2024-10-28
大鼠肺微血管内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肺组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X6996 |
细胞简介:
大鼠肺微血管内皮分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。微血管内皮细胞密切参与包括再生、发育、伤口愈合等一系列生理及炎症反应。细胞呈梭形或多角形,形成单层后呈鹅卵石样或铺路石样排列。肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障,该屏障对于肺气体交换,调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠肺微血管内皮采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠肺微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
鸭γ干扰素(IFN-γ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠活化素A受体抗体(ACV-RAb)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠脑红蛋白(NGB)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠血小板生成素(TPO)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human deoxyribonucleic protein aibody (DNP-Ab) ELISA Kit 人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)试剂盒
Humangasieceptor,GsaRELISAKit 人促胃液素受体(GsaR)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforACA-IgMELISAKit大鼠抗心0脂抗体IgM
药品乙酸比色法定量试剂盒20次
Mouseoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit小鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)试剂盒规格:96T/48T
猪源产肠毒素性大肠杆菌K99抗体
白细胞蛋白酶3抗体
IGFBP4重组食蟹猴 IGFBP4 蛋白 Protein
Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原 0.5mgMelan-A/MART-1 黑色素-A(抗原)
PDE9A重组人 PDE9A 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CBFB Protein Human 重组人 CBFB / CBF-beta 蛋白
KLK7 Protein Mouse 重组小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 蛋白
Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原 0.5mgMelan-A/MART-1 黑色素-A(抗原)
CBFB Protein Human 重组人 CBFB / CBF-beta 蛋白
IGFBP4重组食蟹猴 IGFBP4 蛋白 Protein
KLK7 Protein Mouse 重组小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 蛋白
PDE9A重组人 PDE9A 蛋白 (His & GST 标签) Protein
大鼠肺微血管内皮细胞小鼠皮质酮/肾上腺酮(CO)ELISA 试剂盒
Prothrombin fragme F1+2 (F1+2) ELISA Kit 人原片段F1+2(F1+2)试剂盒
HumanCollagenaoaibody,CLAELISAKit 人抗胶原蛋白抗体(CLA)试剂盒 96T/48T 进口分装
Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG试剂盒人1,3-二0酸甘油酸(1,3-DPG)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母细胞线粒体粗提分离试剂盒10次
MouseAzidothymidine,AZTELISAKit小鼠(AZT)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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