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更新时间:2024-10-28
大鼠肺动脉平滑肌细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肺动脉 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8181 |
细胞简介:
大鼠肺动脉平滑肌分离自肺动脉组织;肺动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中,把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺动脉起于右心室,在主动脉之前向左上后方斜行,在主动脉弓下方分为左、右肺动脉,经肺门入肺。肺动脉干位于心包内,为一粗短的动脉干。起自右心室,在升主动脉前方向左后上方斜行,至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短,在左主支气管前方横行,分二支进入左肺上、下叶。右肺动脉较长而粗,经升主动脉和上腔静脉后方向右横行,至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。肺动脉平滑肌细胞是肺血管的重要结构细胞之一,在调控肺血管的收缩和舒张功能中有重要作用。肺动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。肺动脉平滑肌细胞的异常是肺动脉高压发生发展的重要病理学特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的关键。研究表明,急性和慢性缺氧均可导致肺动脉高压,即缺氧性肺动脉高压,推断缺氧可能是通过促进肺动脉平滑肌细胞的增殖而参与缺氧性肺动脉高压的发生发展。肺动脉平滑肌细胞主要功能:①细胞表面表达介质(ICAM-1和VCAM-1)参与血管壁炎症反应;②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺动脉平滑肌细胞与主要病生理变化:①平滑肌增生易致肺动脉高压;②先天性肺动脉狭窄;③肺动脉栓塞。
方法简介:
实验室分离的大鼠肺动脉平滑肌采用 - 胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的大鼠肺动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠肺动脉平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
人周期素依赖性激酶9(CDK-9)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CDK9 (Cyclin Depende Kinase 9) ELISA Kit
人周期素依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CDKN2A (Cyclin Depende Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit
人轴突生长诱向因子1(n1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human n1 (Nein 1) ELISA Kit
人轴突生长诱向因子4(n4)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human n4 (Nein 4) ELISA Kit
豚鼠胆囊收缩素A受体(CCKAR)试剂盒 ,英文名: CCKAR ELISA Kit
Human cadherln related neuronal receptor 1 (C-1) ELISA Kit 人钙粘蛋白相关的神经受体1(C-1)试剂盒
rabbitProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 兔子前列腺素E2(PGE2)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforB7-2/sCD86ELISAKit大鼠可溶性CD86
线虫甲基磺酸甲酯(MMS)诱导突变试剂盒10次
rabbitbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)试剂盒规格:96T/48T
周期素依赖激酶1抗体
艾滋病病毒抗体
CD79B重组大鼠 CD79B / B29 蛋白 Protein
FGF1 (aFGF 0.5mgFGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素结合生长因子( 酸性成纤维细胞生长因子)(多肽片断抗原)
CCL17重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 Protein
IL36A Protein Human 重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白
EFNA5 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)
FGF1 (aFGF 0.5mgFGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素结合生长因子( 酸性成纤维细胞生长因子)(多肽片断抗原)
IL36A Protein Human 重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白
CD79B重组大鼠 CD79B / B29 蛋白 Protein
EFNA5 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)
CCL17重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 Protein
大鼠肺动脉平滑肌细胞小鼠去甲(NE)试剂盒
Human urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 人型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)试剂盒
Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)试剂盒 96T/48T 进口分装
GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4试剂盒豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母细胞可溶性总蛋白制备试剂盒20次
MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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