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更新时间:2024-10-27
大鼠脾淋巴细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脾脏组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 不规则细胞 | YS-01X7537 |
细胞简介:
大鼠脾淋巴分离自脾脏组织;脾脏是机体最大的免疫器官,占全身淋巴组织总量的25%,含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心。位于左季肋区后外方肋弓深处,与9-11肋相对,长轴与第10肋一致。膈面与膈肌和左肋膈窦相邻,前方有胃,后方与左肾、左肾上腺毗邻,下端与结肠脾沟相邻,地柔软的网状内皮细胞器官。淋巴细胞(lymphocyte)白细胞的一种,由淋巴器官产生,机体免疫应答功能的重要细胞成分。淋巴器官根据其发生和功能的差异,可分为中枢淋巴器官(又名初级淋巴器官)和周围淋巴器官(又名次级淋巴器官)两类。前者包括胸腺、腔上囊或其相当器官(有人认为在哺乳动物是骨髓)。它们无须抗原刺激即可不断增殖淋巴细胞,成熟后将其转送至周围淋巴器官。后者包括脾、淋巴结等。成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化增殖,继而发挥其免疫功能。
方法简介:
见说明
质量检测:
本公司生产的大鼠脾淋巴采用机械研磨法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为1×10^6cells/瓶;细胞纯度可达95%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
RPMI-1640、FBS、淋巴细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
人重去甲上腺素(NE-B)检测试剂盒 96T/48T
人血管生长因子(TAF)检测试剂盒 96T/48T
人相关抗原(TAA)检测试剂盒 96T/48T
人特异性抗原(TSA)检测试剂盒 96T/48T
豚鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)检测试剂盒 ,英文名: ACTH ELISA Kit
Many people immunoglobulin receptor (poly-IgR) ELISA Kit 人多免疫球蛋白受体(poly-IgR)检测试剂盒
rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforBeta-HexA(MouseBeta-hexosaminidaseA)ELISAKit小鼠β氨基己糖苷酶A
细菌细胞色素氧化酶活性比色法定量检测试剂盒20次
rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit兔子透明质酸(HA)检测试剂盒规格:96T/48T
羊抗人球蛋白A
PE标记人CD45RB单克隆抗体
FZD5重组人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
神经生长因子(NGF)重组蛋白 Recombinant Nerve Growth Factor (NGF)
TRIP10重组人 TRIP10 / Cip4 蛋白 Protein
IL3RA Protein Human 重组人 IL3RA / CD123 蛋白
HA Protein Influenza 重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
神经生长因子(NGF)重组蛋白 Recombinant Nerve Growth Factor (NGF)
IL3RA Protein Human 重组人 IL3RA / CD123 蛋白
FZD5重组人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
HA Protein Influenza 重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
TRIP10重组人 TRIP10 / Cip4 蛋白 Protein
大鼠脾淋巴细胞猪肝细胞生长因子(HGF)ELISA 试剂盒
Human Ureaplasma urealyticum aibody (UU-Ab) ELISA Kit 人解脲脲原体抗体(UU-Ab)检测试剂盒
PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 猪内皮型合成酶3(eNOS-3)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforAlpha-bungarotoxin,Alpha-BGTELISAKitα-银环蛇毒素
血液赖(lysine)含量化学比色法定量检测试剂盒20次
NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISAKit裸鼠蛋酸酶(PP)检测试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。