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更新时间:2024-11-05
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:鸡肾小管上皮细胞
组织来源:肾组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
鸡肾小管上皮分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾小管是机体肾脏器官上与肾小囊壁层相连的一条细长上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。肾小管按不同的形态结构、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和远端小管三部分;近端小管可分为直部和曲部,曲部也称为近曲小管,位于皮质迷路内,于肾小体附近高度蟠曲;远端小管曲部也称为远曲小管,位于皮质迷路内。肾小管上皮细胞是肾小管外面的一层细胞,肾小管上皮细胞的分离、培养是研究肾脏疾病的一项重要技术,目前该分离方法有酶分离法、化学分离法筛网分离法、显微解剖分离法、流式细胞仪分离法等。肾小管上皮细胞主要功能:①肾小管上皮细胞重吸收原尿中几乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非营养物质进入终尿;③细胞能分泌炎症介质如细胞因子和趋化因子,通过产生IL-8或直接趋化白细胞参与急性炎症反应;④移植肾炎症和新月体肾炎中PTEpiC表达IL-2R和MHC-Ⅱ类抗原,这说明肾小管上皮细胞参与肾免疫损伤的发生。随着对肾间质纤维化机制研究的日渐加深,肾小管上皮细胞(RTECs)在其中的作用日益被人们重视。因此,提供良好的肾小管上皮细胞模型,在肾小管间质疾病的发病机制和治疗药物筛选的研究中是非常重要的
方法简介:
公司实验室分离的鸡肾小管上皮采用筛网过滤、胶原酶消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的鸡肾小管上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
公司正在出售的产品:
小鼠脑肽 英文名称: brainnaiureticpep tid 规格: 英文缩写: BNP
小鼠N端前脑素 英文名称: N-terminal pro-brain naiuretic peptide 规格: 英文缩写: -proBNP
小鼠骨唾液酸蛋白 英文名称: bone sialoprotein 规格: 英文缩写: BSP
小鼠尿素氮 英文名称: Mouse Blood Urea Niogen 规格: 英文缩写: BUN
小鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human guanine nucleotide dissociation inhibitor (GDI) ELISA Kit 人鸟苷酸解离抑制因子(GDI)试剂盒
Humangalanin,GALELISAKit 人甘肽/甘素(GAL)试剂盒 96T/48T 进口分装
guineapigLeukoieneB4,LT-B4试剂盒豚鼠白三烯B4(LTB4)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母细胞壁可溶性总蛋白制备试剂盒20次
Mousecalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit小鼠降钙素基因相关肽(CGRP)试剂盒规格:96T/48T
RNA核酸外切酶同源蛋白2抗体
甲型流感病毒血凝素抗体
DKK1重组恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, His 标签) Protein
p38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原 0.5mgp38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原)
NETO1重组人 NETO1 / BTCL1 蛋白 Protein
CRABP1 Protein Human 重组人 CRABP1 / RBP5 蛋白
FGFR2 Protein Mouse 重组小鼠 FGFR2 / CD332 蛋白
p38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原 0.5mgp38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原)
CRABP1 Protein Human 重组人 CRABP1 / RBP5 蛋白
DKK1重组恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, His 标签) Protein
FGFR2 Protein Mouse 重组小鼠 FGFR2 / CD332 蛋白
NETO1重组人 NETO1 / BTCL1 蛋白 Protein
鸡肾小管上皮细胞大鼠补体片断5(C5)试剂盒 ,英文名: C5 ELISA Kit
Mouse TGF- beta inducible early gene 1 (TIEG1) ELISA Kit 小鼠TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)试剂盒
ELISA 小鼠β内啡肽(mouse β-EP) 进口分装
CLIAKitforLambda-IgLC(Humanlambdaimmunoglobulinlightchain)ELISAKit轻链lambda
通用型WNV(WESTNILE)病毒定性试剂盒20次
ELISAKitC3鲑鱼补体蛋白3