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更新时间:2024-11-05
大鼠精原细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
睾丸 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 圆形、椭圆形 | YS-01X8238 |
细胞简介:
大鼠精原分离自睾丸组织;睾丸呈微扁的卵圆形,表面光滑,覆盖着鞘膜脏层;深部是质地坚韧的白膜,在睾丸后缘增厚并进入睾丸,形成睾丸纵膈,纵膈发出许多睾丸小隔深入睾丸实质,将实质分为睾丸小叶,数量约为100~200。每个小叶内约有2~4条生精小管,具有产生精子的作用;生精小管之间的结缔组织中有睾丸间质细胞,具有产生雄激素的作用。生精小管首先汇合成为精直小管(也称直精小管),精直小管进入睾丸纵膈形成睾丸网,之后睾丸网发出12~15条输出小管通过睾丸后上缘进入附睾。生精小管的生精上皮是精子产生的地方,由生精细胞和支持细胞构成,成人的生精小管有30~70cm长。精子的产生过程包括生精细胞的分化、支持细胞的作用、雄激素的调节等。生精细胞并不是一种细胞,它是多种细胞的统称,包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞、精子。前者依次发育分化为后者,且依次从生精上皮的基部到管腔面排列,最终形成精子进入到管腔之中,并借助生精上皮外侧的肌样细胞的收缩作用向下一级管腔移动。精原细胞是指由睾丸精子管上皮的原始生殖细胞经过多次有丝分裂而形成的细胞。原始的胚细胞经分化形成精原细胞,精原细胞经复制形成初级精母细胞,初级精母细胞经过减数第一次分裂后形成次级精母细胞,再经过减数第二次分裂形成精细胞。精细胞经过变形最终形成精子。精原细胞属于雄性生殖细胞的早期发育阶段,能不断地进行有丝分裂,增加细胞数量,并分化为精母细胞。精原细胞贴近基膜,细胞呈圆形,核大而圆,梁色深。精原细胞在男性的一生中具有几乎无限分裂的能力,而且分裂过程中能够保持原有的基因性状不变。在增殖过程中,通过精原细胞的分裂和分化,由精原细胞产生精母细胞,进入成熟分裂,因而通过增殖可大大增加精母细胞的数量。按理论推算,一个精原细胞通过数次细胞分裂,可形成上百个初级精母细胞。但在生精过程早期,生精细胞很易发生变性,故实际上少于这个数字。在精原细胞的增殖过程中,有一部分Ad型精原细胞不再继续分裂,而是保留下来,成为新的精原干细胞,因此通过增殖不仅能使精原干细胞不断得到更新,且能使精原干细胞保持一定数量,从而使精子的产生持续地进行下去,不会枯竭。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的大鼠精原采用混合酶多步消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的大鼠精原经AP(碱性磷酸酶)免疫组化染色鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、GDNF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:圆形、椭圆形
传代特性:可传2-3代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠精原体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔子补体片断3a(C3a)试剂盒 96T/48T
兔子补体蛋白4(C4)试剂盒 96T/48T
兔子表皮生长因子(EGF)试剂盒 96T/48T
兔子白血病抑制因子受体(LIFR)试剂盒 96T/48T
小鼠八聚体结合转录因子4(OCT4)试剂盒 96T/48T
Rat epinephrine (EPI) ELISA Kit 大鼠(EPI)试剂盒
Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISAKit 人骨碱性0酸酶(BALP)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humancatecholamine,CA试剂盒人儿茶酚胺(CA)试剂盒规格:96T/48T
转基因油菜(canola)HCN92品系试剂盒20次
humansimilaoRIKENcDNA2610307008geneELISAKit人类似RIKENcDNA2610307008基因试剂盒规格:96T/48T
叉头蛋白B1抗体
磷酸化β分泌酶抗体
MEP1A重组小鼠 MEP1A 蛋白 Protein
CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜环肽
UBE2D4重组人 UBE2D4 蛋白 Protein
GOLM1 Protein Human 重组人 GOLM1 / GP73 蛋白
TGFB1 Protein Rat 重组大鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白
bovine Insulin protein 牛胰岛素蛋白 10mgbovine Insulin protein 牛胰岛素蛋白
GOLM1 Protein Human 重组人 GOLM1 / GP73 蛋白
THSD1重组小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 Protein
MBL1 Protein Rat 重组大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 标签)
BMPR1B重组人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 标签) Protein
大鼠精原细胞大鼠白三烯E4(LTE4)试剂盒 ,英文名: LTE4 ELISA Kit
Mouse beta glucosidase (beta -glucosidase) ELISA Kit 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)试剂盒
ELISA 小鼠胃泌素(mouse Gasin) 进口分装
CLIAKitforIRF(HumanierferoegulatoryFactor)ELISAKit人干扰素调节因子
通用型番茄疮痂病辣椒斑点病菌(Xahomonascampesispv.vesicatoria;Xcv)试剂盒20次
NGAL大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白
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