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更新时间:2024-11-07
小鼠视网膜星形胶质细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
视网膜 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8529 |
细胞简介:
小鼠视网膜星形胶质分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。星形胶质细胞为中枢神经系统中的伙伴神经元提供多种支持功能,如发育过程中的神经引导、终生的营养和代谢支持。大量研究表明,星形胶质细胞是中枢神经系统中功能多样的细胞群之一。脑卒中和其他损伤时,正常星形胶质细胞功能受损可严重影响神经元存活。视网膜星形胶质细胞对神经元的稳态和视网膜的功能至关重要。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的小鼠视网膜星形胶质采用酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的小鼠视网膜星形胶质经GFAP免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:基础培养基,含FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传2-3代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
小鼠视网膜星形胶质体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠骨保护素配体(mouse OPGL) 作用: ELISA 试剂盒 组装/原装
小鼠血小板活化因子(mouse PAF) 作用: ELISA 试剂盒 组装/原装
小鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(mouse PAP) 作用: ELISA 试剂盒 组装/原装
小鼠血小板相关抗体IgG(mouse PAIgG) 作用: ELISA 试剂盒 组装/原装
信号传导T淋巴细胞活化相关蛋白抗体
Myc tag标签单克隆抗体
CCL3重组大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein
CX36 (Connexin-36 0.5mgCX36 (Connexin-36) 间隙连接蛋白36抗原
GPR56重组人 GPR56 / TM7LN4 蛋白 Protein
DUSP14 Protein Human 重组人 DUSP14 / MKP-6 蛋白 (His & MBP 标签)
F7 Protein Mouse 重组小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
CX36 (Connexin-36 0.5mgCX36 (Connexin-36) 间隙连接蛋白36抗原
DUSP14 Protein Human 重组人 DUSP14 / MKP-6 蛋白 (His & MBP 标签)
CCL3重组大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein
F7 Protein Mouse 重组小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
GPR56重组人 GPR56 / TM7LN4 蛋白 Protein
小鼠抗利尿激素/血管加压素/精酸加压素(ADH/VP/AVP)ELISA pcr检测试剂盒
Rat ai sperm aibody (AsAb) ELISA Kit 大鼠抗抗体(AsAb)试剂盒
HumanconcanavalinA,ConAELISAKit 人刀A(ConA)pcr检测试剂盒分装
Humanangiopoietin-likeprotein3,ANGPTL3试剂盒人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)试剂盒规格:96T/48T
植物钙ATP酶(Ca++-ATPase)活性比色法定量试剂盒20次
IL-1αELISAKit鱼类白介素1α(IL-1α)试剂盒规格:96T/48T
小鼠视网膜星形胶质细胞大鼠铁反应元件结合蛋白2(IREB2)试剂盒 ,英文名: IREB2 ELISA Kit
Mouse myeloperoxidase specificity of ai neuophil cytoplasmic aibody IgG (MPO-ANCA IgG)ELISA Kit 小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)试剂盒
RatFreeThyroxine,FT4ELISAKit 大鼠游离甲状腺素(FT4)pcr检测试剂盒分装
CLIAKitforHO-1(Mousehemeoxygenase1)ELISAKit小鼠血红素氧合酶1
细胞PKCβ1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯
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