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更新时间:2024-11-05
兔脊髓微血管内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脊髓: | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X8371 |
细胞简介:
兔脊髓微血管内皮分离自脊髓组织;脊髓是细细的管束状的神经结构,位于脊柱的椎管内且被脊椎保护;是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分,在椎管里面,上端连接延髓,两旁发出成对的神经,分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形(蝴蝶型)灰质区,主要由神经细胞构成;在灰质区周围为白质区,主要由有髓神经纤维组成;脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经(称为脊神经)分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7-9微米,数量极多,成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成,厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织,其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的毛细血管由一个内皮细胞围成管腔,较粗的毛细血管由2-3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的毛细血管,内皮细胞间为缝隙连接(缝隙宽150埃),称连续毛细血管;分布于内分泌腺、肾脏等处的毛细血管,除有缝隙连接外,细胞本身有许多小孔,(孔径800-1000埃),称有孔毛细血管;分布于肝、脾、骨髓及某些内分泌腺的毛细血管,管腔扩大,称血窦。毛细血管的管壁薄、通透性大、管径细(8-10微米)、数量多、血流速度慢,这些特点使其成为血液与组织液进行物质交换的场所,又称交换血管。血窦(sinusoid)由毛细血管管腔扩大而成,窦壁的一般结构与毛细血管壁相同,由单层内皮细胞构成,内皮细胞膜上有窗孔。不同器官的窦壁结构各有差别。脾血窦的内皮细胞间有较宽裂隙;肝血窦内皮细胞是不连续的,有较宽的细胞隙(0.1-0.5微米);肝、脾血窦的基膜不完整或无基膜,通透性比毛细血管大,较大的蛋白质和血细胞可以通过。肝血窦壁内有枯否细胞,脾血窦内外有巨噬细胞,这两种细胞都有吞噬能力,可吞噬清除血液中的异物、细菌等有害物质,是机体单核巨噬细胞系统的重要组成分。某些内分泌腺的血窦有连续的基膜。
方法简介:
实验室分离的兔脊髓微血管内皮采用-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔脊髓微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔脊髓微血管内皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠 IgG(mouse IgG) 作用: ELISA 规格: 96T 美国 ADI
小鼠类胰岛素样生长因子 -1 (mouse IGF-1) 作用: ELISA 规格: 96T 美国 R&D
小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA Kit 作用: ELISA 规格: 96T 美国 R&D
小鼠白介素 -1 a (mouse IL-1 a ) 作用: ELISA 规格: 96T 奥地利 Bender
维甲酸相关孤儿受体α抗体
EHBP1L1蛋白抗体
CXADR重组小鼠 CXADR 蛋白 Protein
Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂联素受体-2(抗原)
AGER重组人 AGER / RAGE 蛋白 Protein
FCGR2B Protein Human 重组人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated
IL13RA1 Protein Rat 重组大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 标签)
Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂联素受体-2(抗原)
FCGR2B Protein Human 重组人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated
CXADR重组小鼠 CXADR 蛋白 Protein
IL13RA1 Protein Rat 重组大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 标签)
AGER重组人 AGER / RAGE 蛋白 Protein
小鼠钙通道阻滞剂(CCB)ELISA pcr检测试剂盒
Human aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 人水通道蛋白4(AQP-4)试剂盒
Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 人血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)pcr检测试剂盒分装
HumanApolipoproteinC3,ApoC3试剂盒人载脂蛋白C3(ApoC3)试剂盒规格:96T/48T
植物氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(过氧亚硝基阴离子)20次
Humaoll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit人Toll样受体9(TLR-9/CD289)试剂盒规格:96T/48T
兔脊髓微血管内皮细胞大鼠细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)试剂盒 ,英文名: SOCS1 ELISA Kit
Mouse glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit 小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)试剂盒
MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit 小鼠Ⅰ型胶原(ColⅠ)pcr检测试剂盒分装
HSV-IIgM单疱疹Ⅰ型病毒IgM(捕获法二步法)
细胞IRAK4激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-4大鼠白介素4
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行