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PCR检测试剂盒在使用时可有什么要领

日期:2022-05-29浏览:83次

 
  PCR检测试剂盒采用聚合酶链式反应(PCR)技术检测,可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因,进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域,不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较,本方法更为快速,特异性更高。
  PCR检测试剂盒引物是PCR特异性反应的关键,PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
  PCR检测试剂盒的使用要领:
  ①开始检测前请仔细阅读该产品简介全文。
  ②操作时应尽量避免说话,以免引起样品污染,而造成假阳性。
  ③整个检测过程中,反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增应分区域进行,以避免交叉污染。
  ④尽量使用一次性材料,包括过滤芯吸头,EP试管,橡胶手套等。
  ⑤实验时,试剂盒组成中的试剂除酶外使用前应置4℃提前融化(混匀时禁止激烈振荡),酶始终置于-20℃保存。
  ⑥检测反应管中加入所有的试剂后,应尽快上PCR仪进行扩增,以免扩增冷启动及形成过多的二聚体。
  ⑦保存:-20℃,保质期一年。

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