17羟孕酮elisa试剂盒是用于定量测量样本中17羟孕酮(17-OHP)含量的实验工具。采用了竞争性抑制酶免疫分析技术或双抗体一步夹心法酶联免疫吸附法。在检测过程中,特异性抗体与样本中的17-OHP发生竞争性结合反应,通过酶标仪测量反应后的颜色深浅来间接反映样本中17-OHP的浓度。
一、核心保存条件
温度控制
短期保存(1周内):试剂盒应存放在2-8℃的冰箱中(如医用冷藏柜),避免温度波动。
长期保存(超过1周):若需长期保存,建议分装后置于-20℃或更低温度(如-70℃),但需避免反复冻融。
运输条件:运输时需使用干冰或生物冰袋维持2-8℃低温,防止试剂失效。
避光环境
试剂盒中的显色剂(如底物A、B)对光敏感,需避光保存。建议使用原装避光包装或存放于不透光的容器中。
密封性
未使用的板条应立即放回自封袋中,并确保密封良好,防止潮湿空气进入导致试剂性能下降。
酶标包被板开封后若未用完,需将剩余板条装入密封袋,并加入干燥剂(如硅胶颗粒)以吸收潮气。
二、关键操作规范
使用前平衡温度
从冷藏环境中取出试剂盒后,需在室温(20-25℃)下平衡15-30分钟,使试剂温度与室温一致,避免冷凝水影响实验结果。
避免反复冻融
样本和试剂若需冷冻保存,应按一次用量分装,避免多次解冻导致蛋白质变性或活性丧失。
溶解后的标准品应丢弃,不可再次冷冻保存。
防止交叉污染
使用一次性吸头,避免加样器金属部分接触终止液或底物,防止试剂间交叉污染。
不同批号的试剂不得混用,以免影响实验重复性。
三、样本保存与处理
血清/血浆样本
采集后需尽快离心(2000-3000转/分,10-20分钟),分离上清液。
若无法及时检测,可短期保存于2-8℃(1周内),长期保存需分装后置于-20℃或-80℃,避免反复冻融。
细胞培养上清/组织匀浆
细胞培养上清需离心(1000×g,20分钟)去除颗粒后保存。
组织匀浆需用预冷PBS(pH7.4)冲洗,剪碎后加入玻璃匀浆器中冰上研磨,离心后取上清保存。
特殊样本处理
溶血样本不宜检测,因血红蛋白中的过氧化物活性会干扰HRP标记的ELISA反应。
细菌污染样本需离心后取上清,避免内源性酶(如β-半乳糖苷酶)干扰结果。
四、试剂盒组件保存细节
浓缩洗涤液
若出现结晶,可于37℃水浴中加热15分钟助溶,稀释后使用(如1:20稀释)。
稀释后的洗涤液需在24小时内使用完毕,避免污染。
显色剂与终止液
显色剂A易挥发,需避免长时间打开盖子;显色剂B对光敏感,需避光保存。
终止液(如硫酸)具有腐蚀性,操作时需佩戴手套,避免接触皮肤。
五、长期保存建议
定期检查:每月检查试剂盒的有效期和存储条件,确保试剂未过期且保存环境符合要求。
记录管理:建立试剂盒使用台账,记录保存温度、开封日期及使用情况,便于追溯和质量控制。