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小鼠杂交瘤细胞;IE3A10C8E5培养步骤

日期:2022-05-26浏览:76次

小鼠杂交瘤细胞;IE3A10C8E5培养步骤:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法三:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

1)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。弃培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入到冻存液中。

细胞纤毛内转运同源蛋白172抗体

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ICK抗体

肽酰tRNA水解酶ICT1抗体

alpha干扰素诱导蛋白27抗体

细胞纤毛内转运同源蛋白81抗体

Gamma干扰素诱导蛋白16抗体

异柠檬酸脱氢酶3 beta亚基抗体

干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白1抗体

异柠檬酸脱氢酶gamma亚基抗体

Bipped B样蛋白抗体

艾杜糖-2-硫酸酯酶抗体

α-L-艾杜糖苷酶抗体

细胞纤毛内转运同源蛋白122抗体

细胞纤毛内转运同源蛋白140抗体

细胞纤毛内转运同源蛋白20抗体

细胞纤毛内转运同源蛋白43抗体

细胞纤毛内转运同源蛋白80抗体

CD101抗体


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