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小鼠羧化不全骨钙素(ucOC)ELISA试剂盒操作流程

日期:2020-12-03浏览:75次

小鼠羧化不全骨钙素(ucOC)ELISA试剂盒操作流程:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

为了减小过失,是先稀释再加样。而针对这位客户所遇到的疑问,我公司技术人员是这样说明的:
1. 前者测的是稀释和移液的过失,后者只需移液过失。
2. 一般都是稀释一次,分两孔吧。同浓度的分复孔。
3. 由于是从同一原液稀释,一般不考虑稀释过失(稀释过失是存在的),都是稀释到想要的倍数直接分孔(而不是逐个稀释,这样可以使稀释过失减小)。
4. 复孔是为了扫除移液体积,板的影响,以及其他系统过失的,要求复孔的浓度是一起的。稀释后分孔能满意此要求,逐个稀释不能。

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