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更新时间:2024-11-05
小鼠滋养层干细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
胎盘组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7444 |
细胞简介:
小鼠滋养层干分离自胎盘组织;胎盘(placenta)是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官,由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育,依靠胎盘从母体取得营养,而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素,是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代,胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合,以达到母子间物质的交换,这样的结构称假胎盘。滋养层干细胞是胎盘组织细胞的祖细胞,与胚胎着床和胎盘的形成密切相关。胚胎着床和胎盘形成是母体与胎儿建立联系的关键时期,此时期滋养层细胞增殖速度快,滋养层干细胞自我更新和分化旺盛,与多种妊娠相关疾病的发生、发展及其增殖、功能调节的失常有密切关系。在哺乳动物胚胎发育过程中,胚胎细胞次分化形成内细胞团和滋养外胚层。滋养层干细胞是胎盘细胞的前体细胞,在胎盘发育中有重要作用。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠滋养层干采用囊胚组织贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠滋养层干经HLA-E(白细胞抗原)免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
土壤纤维素酶(S-CL)测试盒 可见分光光度法 50管/24样
土壤酶(S-CAT)测试盒 紫外分光光度法 50管/24样
土壤还原酶(S-)测试盒 可见分光光度法 50管/24样
土壤蔗糖酶(S-SC)测试盒 可见分光光度法 50管/24样
小鼠26S蛋白酶体(26S PSM)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human pepsinogen A (PG-A) ELISA Kit 人原A(PG-A)试剂盒
HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit 人超敏前列腺特异性抗原(PSA-US)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanconnectivetissuegrowthfactor,CTGF试剂盒人结缔组织生长因子(CTGF)试剂盒规格:96T/48T
组织CDK5/P35激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
HumanProteinZELISAKit人蛋白Z(ProteinZ)试剂盒规格:96T/48T
Kelch样蛋白17抗体
谷脱氢酶2抗体
GLYCOPROTEIN重组苏丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白 Protein
TIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator 0.5mgTIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator ) P53诱导糖酵解和凋亡调节因子蛋白(抗原)
CD7重组人 CD7 蛋白 Protein
IFNA2 Protein Human 重组人 Interferon alpha 2 / IFNA2 蛋白
ERAP2 Protein Human 重组人 LRAP / ERAP2 蛋白
TIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator 0.5mgTIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator ) P53诱导糖酵解和凋亡调节因子蛋白(抗原)
IFNA2 Protein Human 重组人 Interferon alpha 2 / IFNA2 蛋白
GLYCOPROTEIN重组苏丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白 Protein
ERAP2 Protein Human 重组人 LRAP / ERAP2 蛋白
CD7重组人 CD7 蛋白 Protein
小鼠滋养层干细胞大鼠迟现抗原(VLA)试剂盒 ,英文名: VLA ELISA Kit
Mouse 8 hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) ELISA Kit 小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)试剂盒
ELISA 小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36) 进口分装
CLIAKitforLEPR(HumanLeptieceptor)ELISAKit人瘦素受体
通用型HRP-DAB底物显色试剂盒10次
ELISAKitFSH促卵泡素
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