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更新时间:2024-11-04
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:小鼠精原干细胞
组织来源:睾丸组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 悬浮
细胞形态 球形
传代特性 可传2-3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠精原干分离自睾丸组织;精原干细胞是位于睾丸生精小管的生精上皮内的一群生精干细胞,是成体内的定向干细胞。精原干细胞的一些优势使其成为动物转基因的理想宿主细胞。精原干细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多项生命活动的调节机制的深入研究,发生机理的进一步阐明以及精原干细胞转染,异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞用于体外培养。在哺乳动睾丸内,发生时一个受高度调控和持续的过程,精原干细胞(SSCs)一方面进行自我更新维持干细胞数量,另一方面又不断执行分化成各级生精细胞直至最后生成。精原干细胞定居在曲精细管上皮的基膜处,是哺乳动物发生的最原始细胞,也是动物体内一起能将遗传信息传递的干细胞。精原干细胞体外培养体系的建立,在生物学、医学、畜牧业生产及制备转基因动物等领域具有广阔的应用前景。精原干细胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群细胞,具有自我更新能力和多向分化潜能,是哺乳动物体内能将遗传信息传递给下一代的成体干细胞。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠精原干采用先机械吹打、后消化,结合Percoll密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠精原干经CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
公司正在出售的产品:
心肌转录因子 4(GATA4) 作用: ELISA 规格: 进口分装
中性粒细胞趋化蛋白 -2(GCP-2) 作用: ELISA 规格: 进口分装
神经胶质细胞衍化营养因子 (GDNF) 作用: ELISA 规格: 进口分装
生长分化因子 -3(GDF-3) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat monocyte chemotactic protein 2 (MCP-2/CCL8) ELISA Kit 大鼠单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)试剂盒
Humanmelanoma-associatedaigen,MAGEELISAKit 人黑色素瘤相关抗原(MAGE)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitfor26SPSMELISAKit大鼠26S蛋白酶体
饮料甘素(dulcin)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次
MouseL-SelectinELISAKit小鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)试剂盒规格:96T/48T
CD134重组兔单克隆抗体
20号染色体开放阅读框107抗体
ABHD10重组人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 标签) Protein
Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1 0.5mgSocs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 细胞激酶信号-1抑制剂(抗原)
CD55重组人 CD55 / DAF 蛋白 Protein
CD177 Protein Human 重组人 CD177 / PRV-1 / PRV1 蛋白 (Fc 标签)
PDCD1 Protein Human 重组人 PD1 / PDCD1 蛋白
Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1 0.5mgSocs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 细胞激酶信号-1抑制剂(抗原)
CD177 Protein Human 重组人 CD177 / PRV-1 / PRV1 蛋白 (Fc 标签)
ABHD10重组人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 标签) Protein
PDCD1 Protein Human 重组人 PD1 / PDCD1 蛋白
CD55重组人 CD55 / DAF 蛋白 Protein
小鼠精原干细胞大鼠高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒 ,英文名: HDL-C ELISA Kit
Porcine ierleukin 1 alpha (IL-1 alpha) ELISA Kit 猪白介素1α(IL-1α)试剂盒
B组轮状病毒(HRV-B)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMHCI/AgBI/H-1IELISAKit大鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类
体液尿素比色法定量试剂盒20次
ELISAKitG6PD牛葡萄糖60酸脱氢酶