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更新时间:2024-11-04
小鼠骨骼肌卫星细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
骨骼肌组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7614 |
细胞简介:
小鼠骨骼肌卫星分离自四肢肌肉组织;骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体神经支配下收缩或舒张,进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带)及暗带(A带)。明带染色较浅,而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间,有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段,叫做一个肌节。肌卫星细胞指骨骼肌中除骨骼肌纤维(肌细胞)外的一种扁平、有突起的细胞。着于肌纤维(肌细胞)表面;当肌纤维(肌细胞)受损后,肌卫星细胞可增殖分化,参与肌纤维(肌细胞)的修复,因此具有干细胞性质。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠骨骼肌卫星采用-胶原酶混合消化法结合多次差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠骨骼肌卫星经Desmin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含FBS、马血清、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传1-3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)试剂盒 96T/48T
小鼠神经肽Y(NP-Y)试剂盒 96T/48T
小鼠神经生长因子(NGF)试剂盒 96T/48T
小鼠神经生长导向因子(Slit2)试剂盒 96T/48T
小鼠双酪酸(dityrosine)试剂盒 96T/48T
Rat maix metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)试剂盒
HumanAprotinin,APELISAKit 人(AP)试剂盒 96T/48T 进口分装
DuckIerleukin-4,IL-4试剂盒鸭白介素4(IL-4)试剂盒规格:96T/48T
藻类菌脂质绿色荧光染色试剂盒20次
MouseCytochrome-C,Cyt-CELISAKit小鼠(Cyt-C)试剂盒规格:96T/48T
β1,4-N乙酰半乳糖氨基转移酶1抗体
胰腺特异转录因子PTF1A抗体
NA重组甲型流感 H1N1 神经酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) (高活性) Protein
phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580 0.5mgphospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide 雄激素受体(多肽)
CSNK1G1重组人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CLEC7A Protein Human 重组人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 蛋白
CPA2 Protein Human 重组人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白
phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580 0.5mgphospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide 雄激素受体(多肽)
CLEC7A Protein Human 重组人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 蛋白
NA重组甲型流感 H1N1 神经酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) (高活性) Protein
CPA2 Protein Human 重组人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白
CSNK1G1重组人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 蛋白 (His & GST 标签) Protein
小鼠骨骼肌卫星细胞大鼠关联血浆蛋白A(PAPPA)试剂盒 ,英文名: PAPPA ELISA Kit
Mouse vascular endothelial cell growth factor (VEGF) ELISA Kit 小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)试剂盒
RatAquaporin0,AQP-0ELISAKit 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforGzms-AELISAKit大鼠颗粒酶A
细胞长链烯脂酰水合酶(ENOYLCOAHYDRATASE)活性比色法定量试剂盒20次
RatUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit大鼠高敏甲状腺素(u-T4)试剂盒规格:96T/48T
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