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更新时间:2024-11-04
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:小鼠骨骼肌成纤维细胞
组织来源:骨骼肌组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传1-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠骨骼肌成纤维分离自四肢肌肉组织;骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体神经支配下收缩或舒张,进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌成纤维细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方。骨骼肌间质中有很多成纤维细胞。成纤维细胞是结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠骨骼肌成纤维采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠骨骼肌成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品:
胰岛素样生长因子结合蛋白5 英文名称: human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5 规格: 英文缩写: IGFBP5
胰岛素 英文名称: Human Insulin 规格: 英文缩写: INS
细胞间粘附分子1 英文名称: Human Iercellular Adhesion Molecule 1 规格: 英文缩写: ICAM-1
干扰素α受体 英文名称: Human Ierferon α Receptor 规格: 英文缩写: IFNαR
鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA 试剂盒
Human ai prothrombin aibody (aPT1/aPT2) ELISA Kit 人抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)试剂盒
HumanInsulieceptorβ,ISR-βELISAKIT 人胰岛素受体β(ISR-β)试剂盒 进口分装
CLIAKitforACV-A(MouseActivinA)ELISAKit小鼠活化素A
血液组织蛋白酶L(CATHEPSINL)活性荧光定量试剂盒20次
MouseProgesterone,PROGELISAKit小鼠孕激素/孕同(PROG)试剂盒
α-(1,3)-岩藻糖基转移酶 4
胰岛素样生长因子结合蛋白1抗体
HGF重组大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein
EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮细胞粘附分子/表皮细胞粘附分子抗原
IL23重组人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
CALML3 Protein Human 重组人 CALML3 蛋白 (His 标签)
LTA4H Protein Mouse 重组小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 标签)
EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮细胞粘附分子/表皮细胞粘附分子抗原
CALML3 Protein Human 重组人 CALML3 蛋白 (His 标签)
HGF重组大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein
LTA4H Protein Mouse 重组小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 标签)
IL23重组人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
小鼠骨骼肌成纤维细胞大鼠胱硫醚β-合酶(CBS)试剂盒 ,英文名: CBS ELISA Kit
Rabbit collagen type III (Col III) ELISA Kit 兔子Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)试剂盒
百日咳杆菌(BP)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMMP-2/GelatinaseAELISAKit大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A
体液基质金属蛋白酶(MMP-2)免疫捕获试剂盒20次
ELISAKitPSA犬前列腺特异性抗原
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作