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更新时间:2024-11-04
兔主动脉内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
主动脉组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X7120 |
细胞简介:
兔主动脉内皮分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉内皮细胞是覆盖在主动脉内面的单层细胞,可分泌一系列血管活性物质而保持血管稳态,当其受到炎症或其它因素刺激后稳态被破坏而导致一些心血管疾病的发生。因此,主动脉内皮细胞已成为研究心血管疾病发病机制及治疗药物的工具。内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞,由一层扁平细胞所组成。它形成血管的内壁,是血管管腔内血液及其他血管壁(单层鳞状上皮)的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统,由心脏直至最小的微血管。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的兔主动脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔主动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
1:250 250g
ypsin1:250,PorcinePancreas 25g
抑制剂 10g
ypsinInhibitor,Soybean 1g
鸭坏死因子α(TNF-α)试剂盒 96T/48T
Human ai keratin aibody (ASA) ELISA Kit 人抗皮肤抗体(ASA)试剂盒
Humaninducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKIT 人诱导型合成酶(iNOS)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforACTN-3(HumanAlpha-Actinin3)ELISAKit人α-辅肌动蛋白3
血液组织纤维型蛋白溶酶原激活剂(tPA)活性比色法定量试剂盒20次
MouseProcalcitonin,PCTELISAKit小鼠降钙素原(PCT)试剂盒规格:96T/48T
FAM161A蛋白抗体
丝/苏蛋白激酶蛋白抗体
IFNA14重组食蟹猴 / 恒河猴 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 Protein
IFN- Gamma(Interferon Gamma 0.5mgIFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse、rat 干扰素-γ多肽抗原(大、小鼠)
ECE2重组人 ECE-2 蛋白 Protein
CALU Protein Human 重组人 CALU / Calumenin 蛋白
ADAM9 Protein Mouse 重组小鼠 ADAM9 蛋白
IFN- Gamma(Interferon Gamma 0.5mgIFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse、rat 干扰素-γ多肽抗原(大、小鼠)
CALU Protein Human 重组人 CALU / Calumenin 蛋白
IFNA14重组食蟹猴 / 恒河猴 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 Protein
ADAM9 Protein Mouse 重组小鼠 ADAM9 蛋白
ECE2重组人 ECE-2 蛋白 Protein
兔主动脉内皮细胞大鼠饥饿激素(GHRL)试剂盒 ,英文名: GHRL ELISA Kit
Rabbit beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)试剂盒
牛免疫缺陷病毒(BIV)核酸试剂盒(-PCR法) 48T
CLIAKitforMouserudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit小鼠的牛血清白蛋白残留检测
体液甘油三酯(iglyceride)含量酶连续循环反应比色法定量试剂盒20次
ELISAKit5-HT人5羟色胺