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更新时间:2024-11-04
兔小肠平滑肌细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
小肠 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8131 |
细胞简介:
兔小肠平滑肌分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,粘膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力,促使食物向下运动。小肠平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。小肠平滑肌肉瘤是起源于小肠壁肌层、黏膜下肌层和肠壁血管平滑肌的恶性肿瘤,是小肠结缔组织恶性肿瘤中最常见的一种。因此,体外小肠平滑肌细胞的培养对研究小肠平滑肌肉瘤提供了基础和前提。此外,体外培养细胞,由于影响因素较为单一,是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的兔小肠平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔小肠平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态优良
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔小肠平滑肌体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠趋化因子 (mouse RAES) 作用: ELISA 规格: 96T 美国 Biosource
小鼠干细胞因子 (mouse SCF) 作用: ELISA 规格: 96T 美国 R&D
mouse SDF-1 a 作用: ELISA 规格: 96T 美国 R&D
小鼠可溶性 E- 选择素 (mouse sE-Selectin/ sCD62E) 作用: ELISA 规格: 96T 美国 R&D
小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human immunoglobulin heavy chain variable region (IgHV) ELISA Kit 重链可变区(IgHV)试剂盒
Humancarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit 人酶2(CA-2)试剂盒 96T/48T 进口分装
FSH试剂盒鱼促卵泡素规格:96T/48T
真菌/酵母非蛋白/游离巯基含量荧光定量试剂盒20次
MouseCollagenaseTypeIIELISAKit小鼠胶原酶II(CollagenaseII)试剂盒规格:96T/48T
APC标记人CD79a单克隆抗体
溶质载体家族22成员13抗体
CSF2重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 标签) Protein
凝溶胶蛋白(GS)重组蛋白 Recombinant Gelsolin (GS)
CCL4重组人 CCL4 / MIP1B 蛋白 Protein
COCH Protein Human 重组人 Cochlin / COCH 蛋白
HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
凝溶胶蛋白(GS)重组蛋白 Recombinant Gelsolin (GS)
COCH Protein Human 重组人 Cochlin / COCH 蛋白
CSF2重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 标签) Protein
HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
CCL4重组人 CCL4 / MIP1B 蛋白 Protein
兔小肠平滑肌细胞大鼠基质细胞衍生因子1(SDF1)试剂盒 ,英文名: SDF1 ELISA Kit
Mouse ansforming growth factor alpha (TGF- alpha) ELISA Kit 小鼠转化生长因子α(TGF-α)试剂盒
RatHomocysteicacid,HcyELISAKit 大鼠同型半胱(Hcy)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFAS/CD95(HumanFactor-relatedApoptosis)ELISAKit人凋亡相关因子
细胞甲基化组蛋白H3-K9染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒10/20次
RatNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit大鼠新生甲状腺素(NN-T4)试剂盒规格:96T/48T