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更新时间:2024-11-04
兔肾小球内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肾 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X7957 |
细胞简介:
兔肾小球内皮分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管,汇流入静脉,而是流入出球小动脉。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后,形成滤液,渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体,肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形,单层贴壁生长;细胞质丰富,细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球毛细血管壁腔侧,与血流直接接触,是肾小球滤过膜的道屏障,可粘附细菌和白细胞,修复基底膜,并有抗凝、抗血栓的作用;所以,体外培养的肾小球内皮细胞在免疫学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的兔肾小球内皮采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化,结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔肾小球内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔肾小球内皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔I型胶原(rabbit Collagen I) 作用: ELISA 规格: 进口分装
兔II型胶原(rabbit Collagen II) 作用: ELISA 规格: 进口分装
兔II型胶原C端肽(rabbit CTX-II) 作用: ELISA 规格: 进口分装
兔D2聚体(rabbit 2-Dimer) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ) ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)试剂盒
Humanadrenomedullin,ADMELISAKit 人肾上腺髓质素(ADM)试剂盒 96T/48T 进口分装
humancoicoopieleasinghormone,CRH试剂盒人促肾上皮质激素释放激素(CRH)试剂盒规格:96T/48T
组织CHK2激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
Humanproteinphosphatase1regulatorysubunitA,PPP1R1AELISAKit人蛋酸酶1调控/抑制因子亚基1A(PPP1R1A)试剂盒规格:96T/48T
20号染色体开放阅读框201抗体
鸟苷酸环化酶β1抗体
S100A6重组小鼠 S100A6 蛋白 Protein
CD7 CD7抗原 0.5mgCD7 CD7抗原
HIST2H2BE重组人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白 Protein
IDH1 Protein Human 重组人 IDH1 蛋白
IGFBP4 Protein Mouse 重组小鼠 IGFBP4 蛋白
CD7 CD7抗原 0.5mgCD7 CD7抗原
IDH1 Protein Human 重组人 IDH1 蛋白
S100A6重组小鼠 S100A6 蛋白 Protein
IGFBP4 Protein Mouse 重组小鼠 IGFBP4 蛋白
HIST2H2BE重组人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白 Protein
兔肾小球内皮细胞大鼠结合珠蛋白(Hpt)试剂盒 ,英文名: Hpt ELISA Kit
Mouse adiponectin (ADP) ELISA Kit 小鼠脂联素(ADP)试剂盒
Ratthrombospondin1,TSP-1ELISAKit 大鼠血小板反应蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFlt3ELISAKit大鼠FMS样酪激酶3
细胞基质金属蛋白酶(MMP)总活性荧光定量试剂盒20次
Ratoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit大鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)试剂盒规格:96T/48T