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更新时间:2024-11-04
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:兔乳腺上皮细胞
组织来源:乳腺组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
兔乳腺上皮分离自乳腺组织;乳腺是复管泡状皮肤腺,主要由腺上皮细胞组成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,导管末梢发育成腺泡;近年来的许多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的发生都与乳腺上皮细胞(MEC)有密切联系,体外分离培养MECs即成为研究开展的关键步骤。乳腺是乳房的腺体组织,乳腺由导管和腺泡组成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常发育是由体内激素和局部合成的生长因子共同调控,其中乳腺表达的生长因子对乳腺上皮细胞的增殖、分化、凋亡产生极大的影响。乳腺上皮分离自分娩后3-5天的乳腺组织,为贴壁生长型细胞,呈多角形、圆形以及短梭形;乳腺上皮细胞主要功能即生乳功能。
方法简介:
公司实验室分离的兔乳腺上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔乳腺上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品:
小鼠促上腺皮质激素(mouse ACTH) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠Active Caspase-3 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠Active Caspase-7 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠Active Caspase-8 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠碱性0酸酶(ALP)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 大鼠可溶性E选择素(sE-selectin)试剂盒
HumanAttacinELISAKit 人抗菌肽(Attacin)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-EJ-aibody,EJ/GlyRS试剂盒人EJ抗体/抗甘氨酰NA合成酶抗体(EJ/GlyRS)试剂盒规格:96T/48T
植物脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感比色法定量试剂盒20次
HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)试剂盒规格:96T/48T
层粘连蛋白受体1重组兔单克隆抗体
钠碘转运体蛋白抗体
FGFR4重组小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
CDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依赖性激酶7抗原 0.5mgCDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依赖性激酶7抗原
AK2重组人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 标签) Protein
ELK1 Protein Human 重组人 ELK1 蛋白 (His & GST 标签)
THPO Protein Mouse 重组小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白
CDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依赖性激酶7抗原 0.5mgCDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依赖性激酶7抗原
ELK1 Protein Human 重组人 ELK1 蛋白 (His & GST 标签)
FGFR4重组小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
THPO Protein Mouse 重组小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白
AK2重组人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 标签) Protein
兔乳腺上皮细胞大鼠巨噬细胞来源趋化因子(MDC)试剂盒 ,英文名: MDC ELISA Kit
Mouse lipoprotein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 小鼠脂蛋白α(Lp-α)试剂盒
Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFN(MouseFibronectin)ELISAKit小鼠纤连蛋白
细胞肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性比色法定量试剂盒25次
RatphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit大鼠0脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)试剂盒规格:96T/48T
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作