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更新时间:2024-10-30
人心脏纤维原细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
心脏组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7593 |
细胞简介:
人心脏纤维原分离自心脏组织;心脏由心肌细胞和非心肌细胞组成,非心肌细胞占细胞总数的70%,其中90%以上的非心肌细胞由心肌成纤维细胞组成。纤维细胞是机能不活跃的成纤维细胞。胞体呈梭形,胞质较少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。电镜下可见,细胞中粗面内质网和高尔基体均不发达。当组织受损时,纤维细胞可转化为成纤维细胞而参与修复过程。纤维细胞和成纤维细胞是处于不同功能状态的同一种细胞,如在组织损伤后的修复过程中,纤维细胞可转化为功能活跃的成纤维细胞。纤维细胞较小,呈多角形,胞质较少,弱嗜酸性,胞核亦较小,染色较深,电镜下粗面内质网较少,高尔基复合体不发达。成纤维细胞较大,呈星形或梭形,有突起,细胞核呈卵圆形,染色质稀疏,染色淡,核仁明显,胞质较多。成纤维细胞能合成和分泌胶原蛋白、弹性蛋白和蛋白多糖,形成胶原纤维、弹性纤维和网状纤维以及基质成分。心肌成纤维细胞主要功能为对心肌细胞起结构支持作用并负责细胞基质外的合成,当心肌损伤时能产生旁分泌生长因子。心肌成纤维细胞是心脏结缔组织中最常见的细胞,可合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维及有机基质,并且在外伤等因素刺激下,部分纤维细胞可重新转变为幼稚的成纤维细胞,其功能活动也得以恢复,参与组织损伤后的修复。因此,对心肌成纤维细胞的生理学研究成为现代心血管领域研究的一个重点。
方法简介:
公司实验室分离的人心脏纤维原采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人心脏纤维原经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态优良
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠结合蛋白4(RBP-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠戊糖素(Peosidine)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human rotavirus aigen (RV Ag) ELISA Kit 人轮状病毒抗原(RV Ag)试剂盒
HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit 人0酯酶Cγ链(PLCγ1)试剂盒 96T/48T 进口分装
Duckcarbonicanhydrase,CA试剂盒鸭子酶(CA)试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞组蛋白H3-K4甲基化荧光显微镜试剂盒(针对二甲基、基)10/20次
MouseDopamineD1receptor,D1RELISAKit小鼠多巴胺D1受体(D1R)试剂盒规格:96T/48T
9号染色体开放阅读框72抗体
电压门控钠离子通道型α4抗体
IL36RN重组小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein
ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受体2A/激活素受体相互作用蛋白2a抗原
MAPKAPK5重组人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CLEC12A Protein Human 重组人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白
ERBB4 Protein Rat 重组大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 标签)
ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受体2A/激活素受体相互作用蛋白2a抗原
CLEC12A Protein Human 重组人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白
IL36RN重组小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein
ERBB4 Protein Rat 重组大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 标签)
MAPKAPK5重组人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 标签) Protein
人心脏纤维原细胞大鼠乳酸脱氢酶B(LDHB)试剂盒 ,英文名: LDHB ELISA Kit
Mouse vasoactive iestinal peptide (VIP) ELISA Kit 小鼠血管活性肠肽(VIP)试剂盒
Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit 大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforGzms-B(MousegranzymesB)ELISAKit小鼠颗粒酶B
细胞二(MDA)比色法定量试剂盒50次
RatVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAKit大鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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