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更新时间:2024-10-30
人心脏微血管内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
心脏组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X7283 |
细胞简介:
人心脏微血管内皮分离自心脏组织;心脏是脊椎动物身体中最重要的一个器官,主要功能是为血液流动提供压力,把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成,左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开,故互不相通,心房与心室之间有瓣膜(房室瓣),这些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动,向器官、组织提供充足的血流量,以供应氧和各种营养物质,并带走代谢的终产物(如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等),使细胞维持正常的代谢和功能。心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面单层扁平上皮样细胞,它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用,在心脏血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。近年来大量研究表明,心肌微血管内皮细胞的功能和病理改变直接影响心肌细胞功能,也是诸多毒素、炎症因子及病毒等重要靶位,其作为体外研究的细胞模型在心肌缺血-再灌注发病机制和细胞间旁分泌细胞生长因子研究中起着重要作用。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人心脏微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人心脏微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔子巨噬细胞性蛋白1α试剂盒 兔子巨噬细胞性蛋白1α试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子巨噬细胞性蛋白1α试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:兔子巨噬细胞性蛋白1α试剂盒、兔子巨噬细胞性蛋白1α 试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
兔子抗中性粒细胞颗粒抗体试剂盒 兔子抗中性粒细胞颗粒抗体试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子抗中性粒细胞颗粒抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:兔子抗中性粒细胞颗粒抗体试剂盒、兔子抗中性粒细胞颗粒抗体试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒 兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒、兔子可溶性细胞间粘附分子1 试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
兔子可溶性血管细胞粘附分子1试剂盒 兔子可溶性血管细胞粘附分子1试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子可溶性血管细胞粘附分子1试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:兔子可溶性血管细胞粘附分子1试剂盒、兔子可溶性血管细胞粘附分子1 试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠白介素23(IL-23)ELISA 试剂盒 96T/48T
People deoxidizing urine three phosphoric acid (DP) ELISA Kit 人脱氧尿三0酸(DP)试剂盒
HumanCalcitonin,CTELISAKit 人降钙素(CT)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humancarcinoembryonicaign,CEA试剂盒人癌胚抗原(CEA/CD66)试剂盒规格:96T/48T
重组腺病毒效价比色法定量试剂盒50次
HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit人可溶性CD86(B7-2/sCD86)试剂盒规格:96T/48T
8号染色体开放阅读框59抗体
低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体
GAG-P24重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418) Protein
Thymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1 0.5mgThymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1)
OXSR1重组人 OXSR1 / OSR1 蛋白 (GST 标签) Protein
GH1 Protein Human 重组人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白
LAIR2 Protein Human 重组人 LAIR2 / CD306 蛋白
Thymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1 0.5mgThymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1)
GH1 Protein Human 重组人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白
GAG-P24重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418) Protein
LAIR2 Protein Human 重组人 LAIR2 / CD306 蛋白
OXSR1重组人 OXSR1 / OSR1 蛋白 (GST 标签) Protein
人心脏微血管内皮细胞大鼠软骨糖蛋白39(GP39)试剂盒 ,英文名: GP39 ELISA Kit
Mouse bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 小鼠溴脱氧核苷尿(BrdU)试剂盒
RatDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit 大鼠脱轻表雄酮(DHEA)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHAELISAKit大鼠透明质酸
细胞半乳糖总含量酶连续循环反应比色法定量试剂盒20次
RatVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)试剂盒规格:96T/48T