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更新时间:2024-10-30
人淋巴血管内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
血管组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X7653 |
细胞简介:
人淋巴血管内皮分离自淋巴管组织;淋巴管由毛细淋巴管汇合而成。其形态结构与静脉相似,但管径较细,管壁较薄,瓣膜较多且发达,外形呈串珠状。淋巴管根据其位置分为浅、深二种。它们管位于皮下,常与浅静脉伴行,收集皮肤和皮下组织的淋巴。深淋巴管与深部血管伴行,收集肌肉和内脏的淋巴。浅、深淋巴管之间有广泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常经过一个或多个淋巴结,从而把淋巴细胞带入淋巴液。主要功能是滤过淋巴液,产生淋巴细胞和浆细胞,参与机体的免疫反应。当局部感染时,细菌、病毒或癌细胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴结肿大。如该淋巴结不能阻止和消灭它们,则病变可沿淋巴管的流注方向扩散和转移。淋巴管内皮细胞(LEC)是衬覆于淋巴管内表面的一种单层扁平上皮,是构成淋巴管壁的主要结构,参与维持体液平衡,调节淋巴细胞再循环和机体的免疫反应和组织液及蛋白质的运输,在疾病过程中也起着重要作用。近年研究表明,LEC还在伤口愈合、淋巴管水肿和炎症扩散等病理过程中起重要作用,而且与肿瘤转移密切相关。淋巴管内皮细胞主要功能:①调节体液、蛋白和组织压力平衡;②为免疫系统的重要组成部分。淋巴管内皮细胞与主要病生理变化:①囊肿型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴结核。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人淋巴血管内皮采用-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人淋巴血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠血小板衍生生长因子(PDGF)试剂盒 96T/48T
小鼠血小板生成素(TPO)试剂盒 96T/48T
小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)试剂盒 96T/48T
小鼠血小板活化因子(PAF)试剂盒 96T/48T
小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)试剂盒
HumanLeucineaminopepridase,LAPELISAKit 人亮氨酰氨基肽酶(LAP)试剂盒 96T/48T 进口分装
CamelEndothelin1,ET-1试剂盒内皮素1(ET-1)试剂盒规格:96T/48T
鱼类组织砷元素比色法定量试剂盒20次
MouseInhibin,INH-AELISAKit小鼠抑制素A(INH-A)试剂盒规格:96T/48T
丝蛋白酶1抗体
APC标记小鼠CD45.2单克隆抗体
FGFR4重组食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
Isulin 胰岛素(抗原 0.5mgIsulin 胰岛素(抗原)
FAM3D重组人 FAM3D 蛋白 Protein
CD58 Protein Human 重组人 LFA-3 / CD58 蛋白 (Fc 标签)
NAALADL1 Protein Mouse 重组小鼠 NAALADL1 蛋白
Isulin 胰岛素(抗原 0.5mgIsulin 胰岛素(抗原)
CD58 Protein Human 重组人 LFA-3 / CD58 蛋白 (Fc 标签)
FGFR4重组食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
NAALADL1 Protein Mouse 重组小鼠 NAALADL1 蛋白
FAM3D重组人 FAM3D 蛋白 Protein
人淋巴血管内皮细胞大鼠线粒体解偶联蛋白2(UCP2)试剂盒 ,英文名: UCP2 ELISA Kit
Pla vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 植物3(VD3)试剂盒
MouseImmunoglobulinG,IgGELISAKit 小鼠免疫球蛋白G(IgG)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanALRELISAKit人肝再生增强因子
细胞HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR扩增试剂盒20次
ELISAKitVLA大鼠迟现抗原