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更新时间:2024-10-30
人晶状体上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
晶状体组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7404 |
细胞简介:
人晶状体上皮分离自晶状体组织;晶状体源自胚胎发育外胚层,仅含有上皮细胞及其产物,晶状体囊膜作为屏障将晶状体与其它类型细胞分开;因而,晶状体上皮细胞培养既无神经和血管组织的干扰,又不受其它类型细胞如成纤维细胞的污染,保证了培养中细胞成分的单一性。晶状体上皮细胞主要负责调节晶状体的生理平衡,包括电解质和液体的输送。在正常的发育过程中,晶状体上皮细胞分化和成熟,然后迁移到晶状体内部,产生晶体蛋白,自身也拉长而变成晶状体纤维细胞,并最终失去细胞核和其它的细胞器。研究表明,晶状体上皮细胞的分化和极化受到了眼部液体中的生长因子的调控,包括表皮生长因子和胰岛素等。细胞贴壁后为扁平不规则多角形,呈单层生长、连成膜状。晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表面的单层上皮细胞,其异常增殖和分化与白内障和后囊混浊的发生密切相关,体外培养是研究其生长规律的主要手段。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人晶状体上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人晶状体上皮经BFSP2(晶状体蛋白)免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠IgE 英文名称: immunoglobulin E 规格: 英文缩写: IgE
小鼠IgG 英文名称: immunoglobulin G 规格: 英文缩写: IgG
小鼠IgM 英文名称: immunoglobulin M 规格: 英文缩写: IgM
小鼠白介素-1α 英文名称: ierleukin-1α 规格: 英文缩写: IL-1α
小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA 试剂盒
Human growth hormone releasing peptide ghrELISA Kit 人生长激素释放肽ghr试剂盒
HumahymosinELISAKit 人肽(Thymosin)试剂盒 进口分装
Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-P试剂盒人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)试剂盒
植物细胞周期G1后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10次
Humaumorangiogenesisfactors,TAFELISAKit人血管生长因子(TAF)试剂盒
双甲基精水解酶1抗体
AF750标记的磷酸化细胞核因子抗体
NAALADL1重组小鼠 NAALADL1 蛋白 (His 标签) Protein
半乳糖凝集素1(GAL1)重组蛋白 Recombinant Galectin 1 (GAL1)
ERN1重组人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977) Protein
FAM3D Protein Human 重组人 FAM3D 蛋白 (His 标签)
FGFR4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (His 标签)
Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35 1mgAmyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀粉样肽25-35(多肽)
FAM3D Protein Human 重组人 FAM3D 蛋白 (His 标签)
NEGR1重组小鼠 NEGR1 蛋白 (His 标签) Protein
CD40 Protein Rat 重组大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白
AMPK重组人 AMPK (G1/B2/A2) Heterotrimer 蛋白 Protein
人晶状体上皮细胞大鼠硝基酪酸()试剂盒 ,英文名: ELISA Kit
Mouse heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 小鼠热休克蛋白90(HSP-90)试剂盒
MouseCoicosterone,COELISAKit 小鼠皮质酮/肾上腺酮(CO)试剂盒 进口分装
CLIAKitforHumanankyrinB,Ank-BELISAKit人锚蛋白B
细胞GSK3激酶总活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitE3大鼠雌三醇