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更新时间:2024-10-29
大鼠终板软骨细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
椎间盘组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7472 |
细胞简介:
大鼠终板软骨分离自椎间盘终板软骨组织;椎体终板是椎体在生长发育过程中,椎体上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板,呈轻度凹陷,即为骨性终板。椎体终板的中央仍为一薄层透明软骨覆盖,并终生存在,即为软骨终板,上下软骨终板与髓核和纤维环连接共同构成椎间盘。椎体终板构成了椎间盘的上下边界,位于椎体中心的松质骨和椎间盘之间。是由软骨下骨和厚度相当的覆盖其上的软骨组成。主要作用是防止椎间盘髓核组织嵌入椎体,同时具有平衡分散应力的作用。成熟的终板软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内,这些终板软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,终板软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,终板软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的终板软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠终板软骨采用胶原酶-联合消化并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠终板软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每3-4天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠CD34(mouse CD34) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠可溶性白细胞分化抗原40配体(mouse sCD40L) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠补体C3a(mouse C3a) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠补体C5a(mouse C5a) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠高敏状腺原酸(u-T3)ELISA 试剂盒
Human eosinophil chemotactic protein Eotaxin 2 (Eotaxin 2/CCL24) ELISA Kit 人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)试剂盒
Humanβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit 人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)试剂盒 进口分装
Humanai-thymocyteglobulin,ATG试剂盒人抗细胞球蛋白(ATG)试剂盒
植物线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒20次
Humanansthyretin,TELISAKit人转甲状腺素蛋白(T)试剂盒
卷曲螺旋结构域蛋白62抗体
小鼠抗人CD19单克隆抗体
FCGRT & B2M重组小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
雌激素受体β(ERβ)重组蛋白 Recombinant Estrogen Receptor Beta (ERb)
EPHA2重组人 EphA2 蛋白 (His 标签) Protein
FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 标签)
CXCL9 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白
ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 0.5mgADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金属基质蛋白酶(抗原)
FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 标签)
FCGR2重组小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 标签) Protein
CHODL Protein Rat 重组大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 (His 标签)
SULT1A3重组人 SULT1A3 蛋白 (His 标签) Protein
大鼠终板软骨细胞大鼠整合素α2(ITGα2)试剂盒 ,英文名: ITGα2 ELISA Kit
Mouse granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 小鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)试剂盒
MouseIerleukin15,IL-15ELISAKit 小鼠白介素15(IL-15)试剂盒 进口分装
CLIAKitforHumanglamicaciddecarboxylase,GADELISAKit人谷脱羧酶
物理法冰冻切片抗原修复处理试剂盒50次
ELISAKitPTHrP大鼠甲状旁腺激素相关蛋白
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。