服务热线
021-59989018
产品简介:
产品型号:
厂商性质:经销商
访问量:88
更新时间:2024-10-29
大鼠直肠平滑肌细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
直肠组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7170 |
细胞简介:
大鼠直肠平滑肌分离自直肠组织;直肠为大肠的未段,位于小骨盆内。上端平第3骶椎处接续乙状结肠,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿过盆膈,下端以而终。直肠上端的大小似结肠,其下端扩大成直肠壶腹,是粪便排出前的暂存部位,最下端变细接。直肠在盆腔内的位置与骶椎腹面关系密切,与骶椎有相同的曲度。直肠周围多脂肪、无纵带,位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。直肠的动脉血供主要是来自肠系膜下动脉的直肠上动脉,来自髂内动脉的直肠中动脉和来自髂内动脉的直肠下动脉。平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式;肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生,这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养,可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠直肠平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠直肠平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔子脱氢表雄酯(DHEA-S)试剂盒 96T/48T
兔子髓0脂碱性蛋白(MBP)试剂盒 96T/48T
兔子瘦素(LEP)试剂盒 96T/48T
兔子结合蛋白4(RBP-4)试剂盒 96T/48T
小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat iact parathormone (i-PTH) ELISA Kit 大鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)试剂盒
Humanproteiyrosinekinase,PTKELISAKit 人蛋白酪激酶(PTK/CD115)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanBromodeoxyuridine,BrdU试剂盒人溴脱氧核苷尿(BrdU)试剂盒规格:96T/48T
植物组织线粒体形态/活性荧光染色试剂盒20次
HumanSomatostatin,SSELISAKit人(SS)试剂盒规格:96T/48T
卷曲螺旋结构域蛋白127抗体
腺嘌呤受体抗体
HA重组甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
phospho-ATF2(pSer490/pSer498 0.5mgphospho-ATF2(pSer490/pSer498) 0酸化活化复制因子2抗原
ALCAM重组人 ALCAM / CD166 蛋白 Protein
GAL Protein Human 重组人 Galanin / GAL 蛋白 (Fc 标签)
CPB1 Protein Human 重组人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 蛋白
phospho-ATF2(pSer490/pSer498 0.5mgphospho-ATF2(pSer490/pSer498) 0酸化活化复制因子2抗原
GAL Protein Human 重组人 Galanin / GAL 蛋白 (Fc 标签)
HA重组甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
CPB1 Protein Human 重组人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 蛋白
ALCAM重组人 ALCAM / CD166 蛋白 Protein
大鼠直肠平滑肌细胞大鼠整合素αM(ITGαM)试剂盒 ,英文名: ITGαM ELISA Kit
Mouse Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 小鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)试剂盒
MouseIerleukin12,IL-12/P70ELISAKIT 小鼠白介素12(IL-12/P70)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit人糖化血红蛋白A1c
无去垢剂裂解液用于物理裂解
ELISAKitTG大鼠甲状腺球蛋白