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更新时间:2024-10-29
大鼠角膜上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
眼角膜组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7387 |
细胞简介:
大鼠角膜上皮分离自眼角膜组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢,如有外物接触角膜,眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明,角膜并没有血管,透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。其主要功能如下:①角膜是的无血管的组织,具有透明的特性和合成许多蛋白的功能,分三层细胞层,外层即是上皮细胞;②角膜上皮细胞能参与先天性免疫,能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统;③角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢酶。角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段,常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠角膜上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠角膜上皮经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
脂肪型脂肪酸结合蛋白 (FABP4) 作用: ELISA 规格: 进口分装
凋亡相关因子 (Fas/Apo-1) 作用: ELISA 规格: 进口分装
凋亡相关因子配体 (Fas-L) 作用: ELISA 规格: 进口分装
胎球蛋白 -A(Fetuin-A) 作用: ELISA 规格: 进口分装
植物B12(VB12)ELISA 试剂盒
Human ai somatic muscle aibody (ASA) ELISA Kit 人抗骨骼肌抗体(ASA)试剂盒
PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit 猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAFP甲胎蛋白定量(一/二步夹心法)
血液血管紧张素Ⅰ转化酶1(ACE1)活性荧光定量试剂盒20次
MouseTestoterone,TELISAKit小鼠睾同(T)试剂盒
FITC标记人CD117 (c-kit)单克隆抗体
核抑制蛋白磷酸酶1抗体
ANGPTL4重组小鼠 ANGPTL4 蛋白 (His 标签) Protein
基质金属蛋白酶26(MMP26)重组蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 26 (MMP26)
SIGLEC6重组人 SIGLEC6 / CD327 蛋白 Protein
ACVR2A Protein Human 重组人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 (His 标签)
IL12B Protein Marmoset 重组绒猴 IL12B / IL-12B 蛋白
基质金属蛋白酶26(MMP26)重组蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 26 (MMP26)
ACVR2A Protein Human 重组人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 (His 标签)
ANGPTL4重组小鼠 ANGPTL4 蛋白 (His 标签) Protein
IL12B Protein Marmoset 重组绒猴 IL12B / IL-12B 蛋白
SIGLEC6重组人 SIGLEC6 / CD327 蛋白 Protein
大鼠角膜上皮细胞小鼠αN已酰基葡糖苷酶(αNAG)ELISA 试剂盒
Rat aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)试剂盒
Humanplacealactogen,HPLELISAKit 人胎盘催乳素(HPL)试剂盒 进口分装
HumanChromogranin,CgA试剂盒人嗜铬蛋白A(CgA)试剂盒
总脂肪酶(lipase)定量试剂盒50次
Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)试剂盒
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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