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更新时间:2024-10-28
大鼠表皮黑色素细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
皮肤组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 长梭形 | YS-01X7332 |
细胞简介:
大鼠表皮黑色素分离自皮肤组织;表皮位于动物皮肤的外层,由胚胎时期外胚层形成,具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构,由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层,即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。黑色素细胞是皮肤产生和维持色素的主要细胞,起源于神经嵴,后逐渐迁移到表皮和毛囊。黑色素细胞的异常或功能的失常导致了一系列难治性色素性疾病的发生,如、黄褐斑等。表皮黑色素细胞主要分布于位于表皮的基底层,与表皮细胞共同组成表皮黑素单位,其主要功能是产生黑素小体保护皮肤免受损害。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠表皮黑色素细胞先消化、后-胶原酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠表皮黑色素经S-100免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 长梭形
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
月桂酰基麦芽糖苷 1g
N-Dodecyl-β-Maltoside
新 5g
NeomycinSulfate 25g
鱼脱酶3(DIO3)ELISA检测试剂盒 ELISA 组装/原装
Human ai IgG aibody to hepatitis A virus (ai-HAV) ELISA Kit 人抗甲型肝病毒IgG抗体(ai-HAV)检测试剂盒
Porcineierleukin17,IL-17ELISAKit 猪白介素17(IL-17)检测试剂盒 进口分装
ADVIgGXI腺病毒IgGⅪ型(间接法二步法)
血液合成酶总活性荧光定量检测试剂盒20次
Mousesolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit小鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)检测试剂盒
胰岛细胞自身抗原1抗体
PTB结合核蛋白2抗体
DLL4重组人 DLL4 蛋白 Protein
趋化因子C-C-基元受体2(CCR2)重组蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 2 (CCR2)
MMP12重组人 MMP12 / MMP-12 / HME 蛋白 (catalytic domain) Protein
ABL1 Protein Human 重组人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 标签)
HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
趋化因子C-C-基元受体2(CCR2)重组蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 2 (CCR2)
ABL1 Protein Human 重组人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 标签)
DLL4重组人 DLL4 蛋白 Protein
HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
MMP12重组人 MMP12 / MMP-12 / HME 蛋白 (catalytic domain) Protein
大鼠表皮黑色素细胞小鼠胰淀素(Amylin)ELISA 试剂盒
Rat big endothelin (Big ET) ELISA Kit 大鼠大内皮素(Big ET)检测试剂盒
HumanComplemefragme4b,C4bELISAKit 人补体片断4b(C4b)检测试剂盒 进口分装
CLIAKitfor5-HIAA(Human5-hydroxyindolaceticacid)ELISAKit人5羟基吲哚乙酸
饮料同酸比色法定量检测试剂盒20次
Mouselymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit小鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)检测试剂盒
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