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基础信息Product information
产品名称:

猪脑微血管内皮细胞

产品简介:

猪脑微血管内皮细胞公司正在出售的产品:SK-OV-3+LUC人卵巢癌细胞荧光素酶标记 H9 (人T淋巴细胞系) 兔主动脉内皮细胞 人类免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp36抗体 小鼠口腔粘膜成纤维细胞 K7M2 wt [K7M2-WT] (小鼠骨肉瘤成骨细胞) 兔肺动脉成纤维细胞 磷酸化组蛋白H4抗体

产品型号:

厂商性质:经销商

访问量:915

更新时间:2024-11-07

产品特性Product characteristics

猪脑微血管内皮细胞

猪脑微血管内皮细胞

商品属性:

组织来源

产品规格

细胞形态

货号

5×105cells/T25细胞培养瓶

内皮细胞样

YS-01X8555

细胞简介:

猪脑微血管内皮分离自脑组织;脑微血管内皮细胞是血脑屏障的主要组成成分,它是组成脑微血管腔面单层扁平上皮样细胞,能够限制可溶性物质和细胞等从血液进入大脑,大脑微血管内皮细胞与外周内皮细胞相比具有一些相同特性。它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用,在脑血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。与外周内皮细胞相同,大脑微血管内皮细胞表面表达细胞粘附分子,调控白细胞进入大脑。由于微血管内皮细胞的器官特异性,内皮细胞通常取源于疾病研究的相关组织。其主要特征如下:①脑微血管内皮细胞存在许多细胞间紧密连接,产生很高的跨内皮阻抗,延迟细胞旁的通量;②脑微血管内皮细胞缺乏内皮细胞的窗孔结构,其液相物质胞饮水平较低;③脑微血管内皮细胞具有不对称定位酶和载体介导转运系统,从而产生“两极分化"的表现型。

方法简介:

实验室分离的猪脑微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10cells/瓶。

质量检测:

实验室分离的猪脑微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息:

包被条件:PLL0.1mg/ml),明胶(0.1%

培养基:基础培养基,含FBSEGFbFGFIGFVEGFHeparinHydrocortisonePenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:内皮细胞样

传代特性:可传2-3

消化液:0.25%

培养条件:气相:空气,95%CO25%

猪脑微血管内皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。

猪脑微血管内皮细胞

细胞传代及冻存:

细胞传代步骤细胞冻存步骤
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

原代细胞的培养方法一般有以下4种:

  ① 组织块培养法

  组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

  ② 消化培养法

  ③ 悬浮细胞培养法

  对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

  ④器官培养

  器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。

猪脑微血管内皮细胞


公司正在出售的产品:

猪免疫球蛋白E(IgE)试剂盒   组装/原装

猪免疫球蛋白A(IgA)试剂盒   组装/原装

猪流行性腹泻病毒抗体(PEDV)试剂盒   组装/原装

0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)试剂盒   组装/原装

FITC标记人CD11c单克隆抗体

酸性线粒体肌酸激酶抗体

CLEC4F重组大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein

Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鸟苷三0酸酶-发动蛋白2抗体

BLNK重组人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 标签) Protein

ASGR1 Protein Human 重组人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 标签)

TIMP1 Protein Mouse 重组小鼠 TIMP1僀Ꝙ僀

Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鸟苷三0酸酶-发动蛋白2抗体

ASGR1 Protein Human 重组人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 标签)

CLEC4F重组大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein

TIMP1 Protein Mouse 重组小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白

BLNK重组人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 标签) Protein

猪内皮型合酶(eNOS)试剂盒

Human thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 人甲状腺过氧化物酶(TPO)试剂盒

GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豚鼠坏死因子α(TNF-α)试剂盒分装

CLIAKitforAmylin(MouseAmylin)ELISAKit小鼠胰淀素

血液S转移酶(GSHST)总活酶动力性比色法定量试剂盒20

PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKitB细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)试剂盒

猪脑微血管内皮细胞大鼠活化素A受体抗体IgM(ACV-RAb IgM)试剂盒 ,英文名: ACV-RAb IgM ELISA Kit

Rabbit pyridinium crosslinks (PY) ELISA Kit 兔交联物(PY)试剂盒

杆菌(BA)核酸试剂盒 48T

CLIAKitforMousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽

体液元素荧光定量试剂盒20

ELISAKitPNP人Ⅲ型前胶原肽

原代细胞的培养条件:

  一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养

  1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;

  2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;

  3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;

  4、 胎牛血清浓度为10%-80%

  5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;

  6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;

  7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;

  8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。

  二、悬浮细胞培养

  1、原代培养时要尽量去除红细胞;

  2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;

  3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;

  4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;

  5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;

  6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行


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