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更新时间:2024-11-05
大鼠髂动脉内皮细胞大
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
髂动脉 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X8253 |
细胞简介:
大鼠髂动脉内皮分离自髂动脉组织;髂总动脉位于机体的盆腔,大鼠的髂总动脉有两条,也就是临床上左右两条分支,它是由腹部最主要的动脉演化而来,由腹部的腹主动脉沿着机体的脊柱方向向下进行,到达第4腰椎后开始分成两支,这就是左右髂总动脉。动脉是介于心室与毛细血管之间的管道,它接近心室的部分,管径大,管壁较厚。经过反复分支,管径逐渐变小,管壁变薄,最后形成与毛细血管构造相似的毛细血管前小动脉,与毛细血管相接。动脉的管径大小和管壁的厚薄,虽相差很大,但构造上均有共同之处。一般均由3层膜组成,最内层称为内膜,由内皮及纵行排列的结缔组织构成;中间的一层称为中膜,由环形排列的组织构成;最外的一层叫外膜,由纵行排列的结缔组织构成。动脉内皮细胞是覆盖在主动脉内面的单层细胞,可分泌一系列血管活性物质而保持血管稳态,当其受到炎症或其它因素刺激后稳态被破坏而导致一些心血管疾病的发生。因此,动脉内皮细胞已成为研究心血管疾病发病机制及治疗药物的工具。内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞,由一层扁平细胞所组成。它形成血管的内壁,是血管管腔内血液及其他血管壁(单层鳞状上皮)的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统,由心脏直至最小的微血管。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的大鼠髂动脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的大鼠髂动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠髂动脉内皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠降钙素原(PCT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 试剂盒 96T/48T
Neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 人神经肽Y(NP-Y)试剂盒
HumancyclophilinB,CyPBELISAKit 人嗜环蛋白/亲环素B(CyPB)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-macrophageaibody试剂盒人抗巨噬细胞抗体(ai-macrophageAb)试剂盒规格:96T/48T
植物培养细胞DNA损伤彗星荧光试剂盒20次
Humanurokinase-typeplasminogenactivator,uPA/PLAUELISAKit人型纤溶酶原激活物(uPA/PLAU)试剂盒规格:96T/48T
AF680标记的活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗体
磷酸化组蛋白H1,4样蛋白抗体
EPHA7重组大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein
DRD3 receptor(dopamine D3 receptor 0.5mgDRD3 receptor(dopamine D3 receptor) 多巴胺受体-D3抗原
ILKAP重组人 ILKAP 蛋白 Protein
ERBB2 Protein Human 重组人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 标签)
TNFRSF10B Protein Mouse 重组小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 标签)
DRD3 receptor(dopamine D3 receptor 0.5mgDRD3 receptor(dopamine D3 receptor) 多巴胺受体-D3抗原
ERBB2 Protein Human 重组人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 标签)
EPHA7重组大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein
TNFRSF10B Protein Mouse 重组小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 标签)
ILKAP重组人 ILKAP 蛋白 Protein
大鼠髂动脉内皮细胞大鼠白介素4(IL-4)试剂盒 ,英文名: IL-4 ELISA Kit
Mouse ierleukin 1 receptor aagonist (IL1Ra) ELISA Kit 小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)试剂盒
ELISA 小鼠组胺(mouse Histamine) 进口分装
CLIAKitforiNOS(Humaninducibleniicoxidesyhase)ELISAKIT人诱导型合成酶
通用型甘薯黑斑病(Ceratocystisfimbriata)试剂盒20次
ELISAKitPROGR大鼠孕同受体