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基础信息Product information
产品名称:

小鼠乳腺成纤维细胞

产品简介:

小鼠乳腺成纤维细胞公司正在出售的产品:金属磷酸酯酶1抗体 锌指蛋白639抗体 原肌球蛋白调节蛋白4抗体 小鼠神经小胶质细胞 大鼠脑微血管周细胞 Raw2647,C17细胞 人肾癌细胞+LUC;SN12-PM6-LUC

产品型号:

厂商性质:经销商

访问量:1133

更新时间:2024-11-04

产品特性Product characteristics

小鼠乳腺成纤维细胞

小鼠乳腺成纤维细胞

商品属性:

组织来源

产品规格

细胞形态

货号

乳腺组织

5×105cells/T25细胞培养瓶

成纤维细胞样

YS-01X7560

细胞简介:

小鼠乳腺成纤维分离自乳腺组织;乳腺位于皮下浅筋膜的浅层与深层之间,浅筋膜伸向乳腺组织内形成条索状的小叶间隔,一端连于胸肌筋膜,另一端连于皮肤,将乳腺腺体固定在胸部的皮下组织之中。乳腺是哺乳动物少数可以重复经历生长、功能分化和退化过程的器官之一。纤维结缔组织伸入乳腺组织之间,形成许多间隔,这些纤维结缔组织对乳房起固定作用,而纤维结缔组织是由成纤维细胞构成的。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的乳腺成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

原代细胞的培养条件:

  一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养

  1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;

  2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;

  3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;

  4、 胎牛血清浓度为10%-80%

  5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;

  6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;

  7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;

  8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。

  二、悬浮细胞培养

  1、原代培养时要尽量去除红细胞;

  2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;

  3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;

  4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;

  5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;

  6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。

方法简介:

公司实验室分离的小鼠乳腺成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测:

公司实验室分离的小鼠乳腺成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相:空气,95%CO25%

小鼠乳腺成纤维细胞

细胞传代及冻存:

细胞传代步骤细胞冻存步骤
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

原代细胞的培养方法一般有以下4种:

  ① 组织块培养法

  组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

  ② 消化培养法

  ③ 悬浮细胞培养法

  对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

  ④器官培养

  器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。

小鼠乳腺成纤维细胞


公司正在出售的产品:

匀浆制作或抽提   Homogenate production or exaction

(皮肤骨骼肌肠肌肉等难匀特殊样品)   (the skin and skeletal muscle and other hard uniform special sample)

超氧化物歧化酶(SOD)检测   Superoxide dismase (SOD) detection

二(MDA)检测   Malondialdehyde (MDA) detection

植物(ETH)ELISA 试剂盒

Human ai parainfluenza virus IgM aibody (ai-PIV IgM) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgM抗体(ai-PIV IgM)试剂盒

PorcineImmunoglobulinG,IgGELISAKit 猪免疫球蛋白G(IgG)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAFUELISAKit大鼠αL岩藻糖苷酶

血液唾液酸(SA)比色法定量试剂盒50

MouseThyroid-Peroxidase,TPOELISAKit小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)试剂盒

PE-Cy5标记人CD57单克隆抗体

G蛋白偶联受体171抗体

IL1A重组人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白 Protein

松弛肽(RLN)重组蛋白 Recombinant Relaxin (RLN)

NCAM2重组人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (His 标签) Protein

ACBD6 Protein Human 重组人 ACBD6 蛋白 (His 标签)

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

松弛肽(RLN)重组蛋白 Recombinant Relaxin (RLN)

ACBD6 Protein Human 重组人 ACBD6 蛋白 (His 标签)

IL1A重组人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

NCAM2重组人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (His 标签) Protein

小鼠乳腺成纤维细胞大鼠分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)试剂盒 ,英文名: SFRP4 ELISA Kit

Rat betacellulin (BTC) ELISA Kit 大鼠β细胞素(BTC)试剂盒

Ratansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 大鼠转化生长因子α(TGF-α)试剂盒 进口分装

CLIAKitforDPPIVELISAKit大鼠二肽基肽酶Ⅳ

细胞葡萄糖激酶(glucosekinase)比色法定量试剂盒20

Rathepaticlipase,HLELISAKit大鼠肝脂酶(HL)试剂盒


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