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更新时间:2024-11-05
大鼠小气道上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
小气道 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X8269 |
细胞简介:
大鼠小气道上皮分离自小气道;临床上通常将内径小于2mm的小细支气管称为小气道。小气道具有气流阻力小,但易阻塞的特点。在平静吸气时,空气进入狭窄的鼻咽部,产生涡流。由于小气道已无软骨支持,在脱离纤维鞘嵌入肺组织后,管腔通畅性不象软骨性气道,易于受胸腔的压力变化的影响。小气道上皮细胞形成连续呼吸道内层,作为隔绝外界有害物质的物理和功能屏障发挥着的作用。小气道位于肺泡和气管的交界处,这些细胞在功能上能够调节免疫反应、产生化学因子进行宿主防御、表达粘附分子,并可能通过HLA-DR表达呈递抗原;它们还能产生液体有助于肺液的平衡。许多呼吸道疾病,如哮喘、支气管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纤维化,都涉及呼吸道表面上皮细胞的破坏;小气道上皮细胞的培养可为防止呼吸道扩增疾病和重塑提供新的治疗选择。小气道的生理功能特点:①小气道阻力小;②气流速度慢;③可调节控制通气与血流比例。
方法简介:
实验室分离的大鼠小气道上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的大鼠小气道上皮经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠小气道上皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)试剂盒 96T/48T
苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)试剂盒 96T/48T
双花扁豆凝集素(DBA)试剂盒 96T/48T
蛇毒因子(CVF)试剂盒 96T/48T
小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human CpG oligodeoxynucleotide (CpG-ODN) ELISA Kit 人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)试剂盒
HumaeninELISAKit 人肾素(Renin)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanComplemefragme3brccptor,C3bR试剂盒人补体片段3b受体(C3bR)试剂盒规格:96T/48T
组织CaMKIV激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
humanproviraliegrationsite1,Pim1ELISAKit人前病毒整合位点1(Pim1)试剂盒规格:96T/48T
CTP合成酶2抗体
牛血清白蛋白抗体
CDC37重组小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 Protein
胱天蛋白酶激活脱氧核糖核酸酶(CAD)重组蛋白 Recombinant Caspase Activated DNase (CAD)
COL5A2重组人 COL5A2 蛋白 (Fc 标签) Protein
IDO1 Protein Human 重组人 IDO1 / IDO 蛋白
IL10 Protein Sus scrofa (Pig) 重组野猪 IL10 / Interleukin-10 蛋白
胱天蛋白酶激活脱氧核糖核酸酶(CAD)重组蛋白 Recombinant Caspase Activated DNase (CAD)
IDO1 Protein Human 重组人 IDO1 / IDO 蛋白
CDC37重组小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 Protein
IL10 Protein Sus scrofa (Pig) 重组野猪 IL10 / Interleukin-10 蛋白
COL5A2重组人 COL5A2 蛋白 (Fc 标签) Protein
大鼠小气道上皮细胞大鼠白介素23(IL-23)试剂盒 ,英文名: IL-23 ELISA Kit
Mouse activated leukocyte cell adhesion molecule (ALCAM) ELISA Kit 小鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)试剂盒
ELISA 小鼠白介素-1a(mouse IL-1a) 进口分装
CLIAKitforIL-8/CXCL8(HumanIerleukin8)ELISAKIT人白介素8
通用型胡萝卜细菌性叶斑病(Xahomonascampesispv.Carotae;Xccar)试剂盒20次
ELISAKitALDH大鼠乙脱氢酶
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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